دانلود پایان نامه:جداسازی و تشخیص مولکولی پاراکوویروس های انسانی از نمونه کلینیکی کودکان مبتلا به گاسترو...
این مطلب را هم بخوانید :
دانلود پایان نامه ارشد : تحلیل روابط همدیدی پرفشار سیبری و دماهای بحرانی دوره سرد سال در ایران مرکزی...
پایان نامه جهت اخذ درجه کارشناسی ارشدM .Sc) )
رشته: جغرافیای طبیعی – گرایش آب و هواشناسی سینوپتیک
عنوان:
تحلیل روابط همدیدی پرفشار سیبری و دماهای بحرانی دوره سرد سال در ایران مرکزی
استاد راهنما:
غلامرضا براتی
استادان مشاور:
محمود احمدی
ابراهیم میرزایی
برای رعایت حریم خصوصی نام نگارنده پایان نامه درج نمی شود
(در فایل دانلودی نام نویسنده موجود است)
تکه هایی از متن پایان نامه به عنوان نمونه :
(ممکن است هنگام انتقال از فایل اصلی به داخل سایت بعضی متون به هم بریزد یا بعضی نمادها و اشکال درج نشود ولی در فایل دانلودی همه چیز مرتب و کامل است)
چکیده
خسارات ناشی از دما های سرد بحرانی بویژه در اکوسیستم های طبیعی و مناطق پرجمعیت شهری در حال افزایش است. ایران مرکزی سرزمینی خشک و مستعد رخداد سرما بویژه طی زمستان است و فاقد منابع تعدیل کننده تنش های دما مانند منابع آب و پوشش گیاهی انبوه است. در تحقیق حاضر برای تعیین امواج سرمای ایران مرکزی، داده های دمای بیشینه روزانه مربوط به مجموع هشت شهر شامل شاهرود، تهران، سمنان، کاشان، اصفهان، یزد، کرمان و بم تهیه و دماهای صفر و زیرصفر آنها به عنوان امواج سرما استخراج شد. بر این اساس، تعداد 47 موج سرما در بازه آماری (1980-2012) شناسایی شد و در دومین مرحله بر پایه 2 معیار زمانی و مکانی یعنی به ترتیب دو روز دوام و درگیری دو ایستگاه و بیشتر، 17 مورد سرمای بحرانی تعیین شد. گشایش پرونده های داده های ترازی هوا تهیه شده از بایگانی NCEP/NCAR، تبدیل آنها به پوشه های متنی طی تاریخ های سرماهای بحرانی و رسم نقشه های هوای روزانه و ترکیبی با استفاده از نرم افزار Surfer سه مرحله از کار بود که به طراحی الگوهای همدید برای تعیین تراز و سمت غالب فرارفت هوای سرد سیبری انجامید. نتایج نشان داد که فرارفت سرما بسوی ایران مرکزی طی 70 درصد مواقع در پایین ترین ترازها (ترازهای دریا و 1000 هکتوپاسکال) و در قالب زبانه های پرفشار سیبری رخ داده است و تنها در 12 درصد اثر پرفشار ارتفاعی تبت و 17 درصد اثر پرفشارهای سرد مهاجر (غربی) آشکار شد.
تحلیل الگوهای های بردار باد و دما در تراز 1000 ه. پ برای آزمون سمت فرارفت هوای سرد طی روزهای رخداد سرماهای بحرانی نشان داد که بردارهای باد در 70 درصد مواقع (12 مورد از 17 مورد)، از سمت جنوب شرق به عنوان دنباله بادهای شرقی از روی افغانستان و پاکستان و گاهی هم از سمت شمال شرق و شرق بر گستره ایران مرکزی راه یافته اند.
کلیدواژه ها: ایران مرکزی، سرمای بحرانی، فرارفت شرقی.
چکیده فارسی.. n
تشکر. n
تقدیم.. n
فهرست مطالب… ………الف
فهرست شکل ها ح
فهرست جدول ها د
1-1. بیان مسأله. 2
n توده هوای عموما گرم وخشک ناشی از پرفشاره جنب حاره 2
nتوده های هوای سرد و خشک ناشی از پرفشار سیبری.. 2
n توده های هوای اقیانوسی مدیترانه ای ناشی از ورود بادهای غربی 2
n توده هوای نسبتا گرم و مرطوب ناشی از ورود زبانه های کم فشار سودانی 3
1-1-1. اهمیت سرماهای بحرانی از نظر محققان.. 3
n به لحاظ مفهومی.. 3
n به لحاظ کمی.. 3
n به لحاظ پیامدها و زیان ها 4
1-1-2. اهداف تحقیق.. 5
1-2. پیشینه تحقیق.. 5
n تحقیقات مربوط به شرایط و چگونگی تشکیل پرفشار سیبری 6
n تحقیقات مربوط به روابط پویشی پرفشار سیبری با دیگر سامانه های دور در قالب پیوند از دور 6
n تحقیقات مربوط به قلمرو گسترش زبانه های هوای سرد پرفشار سیبری 7
n تحقیقات مربوط به شرایط زمانی و مکانی پرفشار سیبری در سرزمین ایران 8
2-1. بنیادهای پژوهش…. 10
2-1-1. هوا 10
2-1-2. آب وهوا 11
2-1-3. دما 11
2-1-4. تغییرات دمایی.. 11
2-1-5. آستانه. 12
2-1-6. حداکثر دمای روزانه. 12
2-1-7. حداقل دمای روزانه. 12
2-1-8. روز سرد. 12
2-1-9. دمای بحرانی.. 12
2-1-10. وزش هوا 12
2-1-11. فرارفت هوای سرد. 12
2-1-12. فشار 13
2-1-13. شیب تغییرات فشار 13
2-1-14. توده های هوا 13
2-1-15. مفهوم همدید. 13
2-1-16. نقشه های هوا 13
2-1-17. ایستگاه همدید. 14
2-1-18. آب و هواشناسی همدید. 14
2-1-19. ناوه (زبانه کم فشار) 14
2-1-20. پشته (زبانه پرفشار) 15
2-1-21. پرفشارها (آنتی سیکلون) 15
2-1-22. پرفشارهای گرمایی.. 15
2-1-23. پرفشار های پویشی.. 16
2-1-24. نقشه سطح متوسط دریا 16
2-1-25. نقشه های ترازهای بالای جو. 16
2-1-26. نقشه های هم ارتفاع ژئوپتانسیل.. 16
2-1-27. پرفشار سیبری.. 17
2-1-28. عامل اصلی تشکیل پرفشار سیبری.. 18
2-1-29. گسترش پرفشار سیبری روی ایران.. 19
2-1-30. پرفشار جنب حاره 19
2-1-31. بادهای غربی.. 19
2-1-32. کم فشار سودان.. 19
2-1-33. واچرخند عربستان.. 20
2-2. سرزمین پژوهش…. 20
2-2-1. سیمای طبیعی ایران مرکزی.. 20
2-2-2. پهنه های آبی اثر گذار بر ایران مرکزی.. 22
< دریای مدیترانه. 22
<دریای سرخ و خلیج عدن.. 22
<دریای سیاه 22
2-2-3. پراکنش دما 23
2-2-4. میانگین دمای ماهانه. 24
2-2-5. دمای بیشینه مطلق ماهانه. 25
2-2-6. دمای کمینه مطلق ماهانه. 26
2-2-7. بارش سالانه. 27
2-2-8. میانگین ماهانه بارش…. 28
2-2-9. پراکنش فشار 30
2-2-10. میانگین ماهانه سمت و سرعت باد غالب در هشت ایستگاه نمونه 32
3-1. پرسشهای پژوهش…. 36
3-2. فرضیات پژوهش…. 36
3-3. گزینش سرزمین پژوهش و ایستگاه های داده سنجی.. 36
3-4. منابع داده ها 38
3-5. تعیین ویژگی های عمومی آبوهوایی سرزمین پژوهش…. 38
3-6. مراحل شناسایی و استخراج موج های سرما 39
3-7. معیار تعیین موج های سرما 42
3-8. معیار تعیین موج سرمای بحرانی.. 42
3-9. معیار تعیین روز اوج سرمای بحرانی.. 42
3-10. مراحل آزمون فرضیه نخست تحقیق.. 43
3-10-1. تهیه داده های ترازی.. 43
این مطلب را هم بخوانید :
3-10-2. تبدیل داده های فشرده به متن.. 43
3-9-3. تعیین محدوده طراحی الگوهای همدید. 43
3-10-4. تبدیل داده های رقومی به نقشه. 44
3-10-5. ترسیم نقشه های ارتفاعی.. 45
3-10-6. تعیین بیرونی ترین پربند بسته برای هر سرما 46
3-10-7. تعیین پربند پشتیبان پرارتفاع سیبری.. 47
3-11. مراحل آزمون فرضیه دوم. 47
3-11-1. رسم نقشه های بردار باد. 47
3-11-2. رسم نقشه های خطوط جریان باد. 48
3-11-3. رسم نقشه های دما 48
3-11-4. کمی کردن نقشه های بردار باد. 48
3-11-5. اسکریپت نویسی میانگین بردارهای باد. 48
3-11-6. اسکریپت نویسی تعیین جهت و سمت غالب بردارهای باد 49
3-11-7. فراخوانی اسکریپت dat.gs به محیط GrADS. 50
3-11-8. کارتوگرافی و تکنیک رسم نقشه ها 52
4-1. تحلیل آماری 47 موج سرماهای بحرانی 53
4-1-1. سه ویژگی سرماهای بحرانی.. 55
<دوام. 55
<شدت… 56
<گسترش مکانی.. 56
4-1-2. نتایج آماری سرماهای بحرانی ایران مرکزی.. 57
4-2. نتایج همدید سرماهای بحرانی ایران مرکزی.. 58
4-2-1. نقش پرفشار سیبری در سرماهای بحرانی ایران مرکزی.. 58
<تراز دریا 65
<تراز 1000 ه.پ… 67
<ترازهای 750 و 500 ه.پ… 69
<تحلیل موقعیت پربند پشتیبان.. 73
<تحلیل الگوهای همدید- تراز 1000 ه.پ… 74
<تحلیل الگوهای همدید- تراز 750 ه.پ… 75
<تحلیل الگوهای همدید- تراز 500 ه.پ… 76
4-2-2. نقش فرارفت های شرقی در سرماهای بحرانی ایران مرکزی 77
<سمت باد، دما و خطوط جریان در ترازهای بالا. 77
<تحلیل سرعت و سمت میانگین باد. 87
<تحلیل الگوهای بردار باد در تراز 1000 ه.پ… 88
5-1. آزمون فرض…. 90
5-2. نتیجه گیری.. 91
5-3. پیشنهادها 92
5-4. تنگناهای تحقیق.. 92
<سرچشمه ها 93
<چکیده لاتین.. 97
تغییر در بسامد بلایای آب و هوایی مانند موج های سرما یکی از مهمترین جنبه های تغییر آب و هوا است (کنکال و همکاران؛ 1999). همه ساله افراد زیادی با گسترش و وقوع موج های گرم و یا بوران های سرمایی هلاک می شوند (علیجانی،1390). در این میان دماهای بسیار سرد به عنوان خطر یا بحران برای انسان تعریف شده اند. اساسا عنصر دما از دیرباز مورد توجه آب وهواشناسان بوده (عساکره؛ 1388)، تغییرات کوتاه مدت و درازمدت آن میتواند ساختار آب و هوای هر محل را دگرگون سازد.
بر اساس گزارش هیأت بین الدول آب وهوا (IPPC. 2001)دمای سطح کره زمین در فاصله زمانی 1861-2001 میلادی حدود 0.6 درجه سانتی گراد افزایش یافته است. این درحالی است که رفتار فراسنج دمای حداقل و حداکثر با یکدیگر متفاوت بوده، دمای حداقل به طور آشکاری نرخ افزایشی داشته است. با وجود افزایش دمای حداکثر، نرخ آن از نرخ دمای حداقل کمتر بوده است (کارل و همکاران،1993).
از این رو بنا به قول شعبانی و همکاران (1392: 896)، مدلسازی متغیرهای حدی دمای هوا و پیش بینی دماهای حداکثر و حداقل به عنوان یکی از مهمترین پارامترهای آب وهوای با توجه به تغییرات آب وهوایی، گرمایش جهانی و خشکسالیها، قطعاً فرصت بیشتری را جهت برنامه ریزی و ارائه تمهیدات لازم به خصوص در آب و هواهای خشک و نیمه خشک در اختیار برنامه ریزان قرار می دهد.
1-1). بیان مساله
ایران به دلیل گستردگی زیاد در طول و عرض جغرافیایی، پیچیدگی در پیکربندی ناهمواری ها و یورش توده های هوا با خاستگاه های گوناگون، از نظر دمایی شرایط ویژه ای دارد. تکرار توده های هوایی که به وسیله سامانه های چرخندی و واچرخندی و یا گسترش زبانه های آنها به ایران می رسند و شرایط رطوبتی و دمایی هوای روزمره را تعیین می کنند؛ در درازمدت، شرایط آب و هوایی ایران را به وجود می آورد (علیجانی،1383: 37).
سرزمین ما به دلیل شرایط جغرافیایی خاص، یعنی موقعیت آن در رابطه با گردش عمومی جو و قرار گرفتن آن در عرضهای جغرافیایی میانه، در فصول مختلف سال تحت تاثیر آنتی سیکلونهایی با منشاهای مختلف و خصوصیات فیزیکی گوناگون قرار می گیرد، از جمله این آنتی سیکلون ها، پرفشار سیبری است که مهم ترین مرکز کنش جوی اوراسیا طی زمستان است و اثر محسوسی بر آب وهوای ایران دارد (لشکری 1375: 4).
از جمله سامانه های موثر بر توده هوای وارد شونده به سرزمین ایران می توان به موارد زیر اشاره کرد؛
n توده هوای عموما گرم و خشک ناشی از پرفشاره جنب حاره: پرفشاره جنب حاره، سامانه پویشی (دینامیکی) بزرگی در مقیاس سیاره ای است که کانونی روی اقیانوس اتلس شمالی دارد. در دوره گرم سال زبانه ای از پرفشار جنب حاره روی ایران است. قلمرو این زبانه از تراز 700 تا 1000 ه.پ گسترش دارد و سبب حاکمیت هوایی گرم و خشک بر بخش بزرگی از ایران (شبانکار و جلبیان، 1389: ص 48)، بویژه در سرزمین های دور از ساحل می شود. با حرکت پرفشارجنب حاره و رودباد همراه با آن به عرض های پایین تر، از ماه دسامبر و ورود بادهای غربی به ایران در دوره سرد سال (امام هادی، 1383: 36) می توان شاهد ورود توده های هوایی دیگری بود.
n توده های هوای سرد و خشک ناشی از پرفشار سیبری: پرفشار سیبری از میانه ی مهر تا میانه ی فروردین بر آسیا حاکم است. این سامانه نقش دمایی مهمی در ایران بازی می کند و چنانکه پیش از این براتی و علیجانی (1378: 55)، تحقیق کرده اند، طی فصل بهار زبانه های سرمای آن از شمال شمال شرق و گاهی شمال غرب به ایران نفوذ می کنند. مسعودیان (1386: 22) نیز به گسترش این هوای بسیار سرد و خشک بر بخش هایی از کشور اشاره دارد.
n توده های هوای اقیانوسی مدیترانه ای ناشی از ورود بادهای غربی: دریای مدیترانه در مسیر بادهای غربی قرار دارد و اثرات آن از طریق این باد ها به ایران گسترش می یابد. در دورۀ سرد سال بر اثر استقرار فرود بلند مدیترانه، سامانه های غربی فشار هوا اعم از موج های سطح بالا و چرخندهای روی زمین به طرف ایران می آیند. از این رو رطوبت بارندگی ها در دورۀ سرد سال به وسیلۀ سامانه های مهاجر دریای مدیترانه تأمین می شود (علیجانی؛1391).
n توده هوای نسبتا گرم و مرطوب ناشی از ورود زبانه های کم فشار سودانی: کم فشار سودانی که در شمال آفریقا تشکیل می شود و در فصل تابستان به صورت یک کم فشار حرارتی عمل می کند و در زمستان رفتار پویشی دارد .هر گاه کم فشار سودانی و مدیترانه ای با هم مرتبط شوند، ناوۀ عمیق در شرق مدیترانه به وجود می آید و موجب ورود توده های نسبتاً گرم و مرطوب و بارش های سنگین در اغلب نقاط ایران می شود (جوانمرد و همکاران،1382).
1-1-1). اهمیت سرماهای بحرانی از نظر محققان
دما از مهمترین عناصر آب وهوایی است و تغییرات ناگهانی آن به ویژه افت دما به مقادیر زیر صفر درجه، منشأ بسیاری از تحولات فیزیکی، شیمیایی و زیست محیطی است. به همین دلیل، بررسی روند دما در مقیاس های مختلف زمانی و مکانی مورد توجه محققان بوده، بخش بزرگی از ادبیات آب وهوا شناسی را به خود اختصاص داده است. در این مجال به بیان اهمیت موضوع دماهای بحرانی سرد از سه جهت می پردازیم:
<به لحاظ مفهومی : هن و همکاران (2009)، در تحقیق خود یک موج سرد را با عنوان یک کاهش دمای سریع و غیرمتعارف برای یک دوره کوتاه مدت 24 ساعته روزانه تعریف کرده اند البته نه سرد مطلق بلکه سردی نسبی معادل انکه انسان کاهش درجه حرارت را احساس کند.
دانلود پایان پایان نامه:مطالعه تطبیقی تأثیر اشتباه بر مسئولیت کیفری در حقوق کیفری ایران و فقه امامیه......
گفتارسوم: موضع قانون مجازات اسلامی1392راجع به اشتباه حکمی برحسب نوع جرم. 61
الف) جرایم مستوجب حد. 61
ب) جرایم مستوجب قصاص… 62
ج) جرائم مستوجب تعزیر. 63
بخش دوم:احکام و مقررات راجع به اشتباه موضوعی.. 66
فصل اول :تأثیراشتباه موضوعی بر مسؤولیت کیفری در فقه امامیه. 67
مبحث اول:جرائم مستوجب حد وتعزیر. 67
گفتاراول:جرایم مستوجب حد. 67
الف-جرم زنا 67
ب- جرم سرقت.. 71
ج-مصرف مسکر. 73
د- سایر حدود. 73
گفتار دوم :جرایم مستوجب تعزیر. 79
الف- ضرب.. 79
ب- جرح. 79
مبحث دوم : جرایم علیه تمامیت جسمانی اشخاص… 80
گفتار اول : قتل. 81
الف- اشتباه در هویت مجنی علیه. 81
1-نظر دسته اول. 81
2-نظر دسته دوم. 82
ب-اشتباه درموضوع. 85
ج-اشتباه در هدف.. 98
د- اشتباه در فعل نوعاً کشنده 101
گفتار دوم: اشتباه در ضرب و جرح و قطع عمدی.. 102
فصل دوم: تأثیر اشتباه موضوعی بر مسؤولیت کیفری در حقوق موضوعه ایران. 106
مبحث اول: جرائم عمدی.. 107
الف – اشتباه در عناصر اساسی تشکیل دهنده جرم. 107
1) شعور یا قدرت تشخیص…. 107
2) اراده 108
3) سوء نیت یا قصد مجرمانه. 108
4)انگیزه 109
5)آگاهی و علم. 109
ب- اشتباه درکیفیات مشدده جرم. 112
گفتار دوم : اشتباه در شخص…. 113
الف – اشتباه در موضوع. 113
ب- اشتباه در هویت.. 114
ج- اشتباه درنتیجه. 114
مبحث دوم: جرائم غیر عمدی.. 116
گفتار اول: دیدگاه مخالفین به رفع مسئولیت کیفری.. 116
گفتار دوم: دیدگاه قائلین به رفع مسئولیت کیفری.. 117
نتیجهگیری و پیشنهادها 117
فهرست منابع و مآخذ. 123
یزلئ
این مطلب را هم بخوانید :
چکیده
در حقوق کیفری اصل بر این است که جهل به قانون رافع مسئولیت کیفری نیست. جهل اعم از بسیط و مرکب بوده و برخلاف اعتقادبرخی از حقوقدانان، اشتباه، عمل خلاف واقعی است که یا ناشی از جهل مرکب فرد نسبت به امور است یا ناشی از جهل بسیط او باشد. جهل واشتباه به عنوان یکی از موارد سلب مسؤولیت، در کنار مواردی مانند کودکی، جنون، اکراه، مستی وخواب آورده می شود که مقرون بودن رفتارارتکابی بدان (اشتباه) باعث منتفی شدن یکی از ارکان مسؤولیت کیفری یعنی قوه تشخیص وتمییز وسپس موجب عدم قابلیت انتساب آن به مرتکب وسلب مسؤولیت کیفری می شود.
اشتباه از لحاظ اصطلاحی عبارت است از « درک وتصور نادرست وخلاف واقع شخص از امری » اشتباه ممکن است به دو حالت الف: اشتباه حکمی ب: اشتباه موضوعی اتفاق بیفتد، اشتباه برحسب اینکه حکمی باشد یا موضوعی، دارای تأثیر ونقش متفاوت وگوناگون در حقوق کیفری (در جرم بودن یا نبودن، مسؤولیت کیفری داشتن یا نداشتن) دارد. در قانون مجازات اسلامی مصوب 1392 تاحدودی به تأثیر اشتباه حکمی برمسئولیت کیفری اشاره شده است ولی در همین قانون مانند قانون مجازات اسلامی 1370 هیچ اشاره صریحی به اشتباه موضوعی نشده است. در این تحقیق دید گاه های فقه امامیه وحقوق موضوعه تأثیر اشتباه برمسئولیت کیفری ازابعاد مختلف موردبررسی قرار گرفته است.
واژگان کلیدی: جهل، اشتباه حکمی، اشتباه موضوعی، مسئولیت کیفری
مقدمه
الف- بیان مسئله
درحقوق کیفری، زمانی رفتارارتکابی ازسوی شخص قابل سرزنش ومجازات است که آن رفتار قابلیت انتساب به شخص را داشته باشد. برای اینکه رفتاری قابلیت به شخص داشته باشد، لازم است که آن رفتار توأم بااوصاف و ویژگی هایی در شخص باشد.این اوصاف عبارتنداز:
الف- قوه تشخیص وتمییز ب –اختیار (اراده آزاد)
این دو ویژگی به عنوان ارکان اصلی مسولیت کیفری محسوب می شوند.اما برخی اوقات ممکن است مرتکب در زمان ارتکاب، فاقد یک یا دوویژگی فوق الذکرباشد. درچنین حالتی رفتار از لحاظ کیفری قابل انتساب به شخص نبوده ووی فاقد مسؤولیت کیفری واهلیت جزایی خواهد بود.
جهل واشتباه به عنوان یکی از موارد سلب مسؤولیت، در کنار مواردی مانند کودکی، جنون، اکراه، مستی وخواب تلقی می شودکه مقرون بودن رفتارارتکابی بدان (اشتباه) باعث منتفی شدن یکی از ارکان مسؤولیت کیفری یعنی قوه تشخیص وتمییز وسپس موجب عدم قابلیت انتساب آن به مرتکب وسلب مسؤولیت کیفری می شود.
اشتباه از لحاظ اصطلاحی عبارت است از:«درک وتصور نادرست وخلاف واقع شخص از امری » اشتباه ممکن است به دو حالت الف: اشتباه حکمی ب: اشتباه موضوعی اتفاق بیفتد، اشتباه برحسب اینکه
دانلود پایان نامه:جداسازی و خالص سازی پروتئین نوترکیب PorA و کانژوگاسیون آن با LPS باکتری بروسلا ملیتنسیس...
عنوان:
جداسازی و خالص سازی پروتئین نوترکیب PorA و کانژوگاسیون آن با LPS باکتری بروسلا ملیتنسیس
استاد راهنما:
مجید مقبلی
استاد مشاور:
هاتف آجودانی فر
برای رعایت حریم خصوصی نام نگارنده پایان نامه درج نمی شود
(در فایل دانلودی نام نویسنده موجود است)
تکه هایی از متن پایان نامه به عنوان نمونه :
(ممکن است هنگام انتقال از فایل اصلی به داخل سایت بعضی متون به هم بریزد یا بعضی نمادها و اشکال درج نشود ولی در فایل دانلودی همه چیز مرتب و کامل است)
فهرست مطالب
چکیده فارسی…………………………………………………………………………………………………
فصل اول:مقدمه(اهداف تحقیق)………………………………………………………………………..
1- 1 طبقه بندی بروسلا…………………………………………………………………………………..
1-2 بیماری زایی و فاکتورهای بیماری زایی……………………………………………………..
1-2-1 ژن کد کننده آنزیم گلوکان حلقوی سنتتاز (cgs)…………………………..
1-2-2 ژن های aroc و purE …………………………………………………………..
1-2-3 پروتئینهای شوک حرارتی…………………………………………………………….
1-2-4 ژن sod…………………………………………………………………………………….
1-3 اپیدمیولوژی……………………………………………………………………………………………
1-4 خصوصیات بیوشیمیایی……………………………………………………………………………
1-5 علایم بیماری………………………………………………………………………………………….
1-5-1 ناخوشى تحت بالینى (ساب کلینیکال)………………………………………….
1-5-2 بروسلوز حاد و تحت حاد……………………………………………………………
1-5-3 بروسلوز موضعى ( لوکالیزه):……………………………………………………….
1-5-4 عود بروسلوز:…………………………………………………………………………..
1-5-5 بروسلوز مزمن……………………………………………………………………………
1-5-6 بیمارى شبه بروسلوز………………………………………………………………….
1-5-7 بروسلوز ناشى از تلقیح واکسن حیوانى………………………………………..
1-6 انتقال بیماری………………………………………………………………………………………….
1-7 پاسخ های ایمنی میزبان به بروسلا…………………………………………………………….
1-8 روشهای تشخیص…………………………………………………………………………………..
1-9 درمان بیماری ………………………………………………………………………………………..
1-10 واکسیناسیون…………………………………………………………………………………………
1-10-1 تولید پروتئین نوترکیب Omp31…………………………………………….
1-10-2 استفاده از NPAP…………………………………………………………………..
1-10-3 استفاده از بروسلا ملیتنسیس سویه WR201……………………………………..
1-10-4 استفاده ازپروتئینهای غشاءداخلی16و19(Omp16&Omp19)بروسلاآبورتوس
1-10-5 تولید سویه زنده تخفیف حدت یافته با جهش بر روی ژنهایmanBA ،virB2 و asp24 در هر دو سویه بروسلا آبورتوس و بروسلا ملیتنسیس
1-10-6 جهش بر روی ژنهای دخیل در سنتز LPS………………………………………….
1-10-7 استفاده از LPS خالص شده بروسلا ملیتنسیس……………………………………
1-10-8 استفاده از پروتئین CP24…………………………………………………………………
1-10-9 نتیجه گیری در مورد بهترین حالت ممکن واکسن انسانی بروسلا ملیتنسیس…
1-10-10 مجوز استفاده از واکسن بروسلا ابورتوس سویه RB51 برای استفاده در گاوها…
1-11 دیواره سلولی باکتری های گرم منفی……………………………………………………….
1-11-1 اندوتوکسین …………………………………………………………………………..
1-11-2 ساختمان LPS ………………………………………………………………………
1-11-3 عملکرد LPS………………………………………………………………………..
1-11-4 تاثیرات LPS………………………………………………………………………….
1-12نایسریا………………………………………………………………………………………………….
1-12-1 پورین های مننگوکوک………………………………………………………….
1-12-2 PorA…………………………………………………………………………………..
فصل دوم: (سابقه وپیشینه تحقیق)
فصل سوم: (مواد و روشها)
3-1 وسایل مورد استفاده ……………………………………………………………………………….
3-2 مواد مورد استفاده……………………………………………………………………………………
3-3 روش کار ……………………………………………………………………………………………..
3-4 رنگ آمیزی گرم …………………………………………………………………………………….
3-5 طرز تهیه استوک ………………………………………………………………………………
3-6 روش استخراج DNA پلاسمیدی …………………………………………………………..
3-6-1 طرز تهیه محلولهای مورد نیاز برای استخراج پلاسمید…………………….
3-6-2 مراحل استخراج DNA پلاسمیدی……………………………………………….
3-7 الکتروفورز …………………………………………………………………………………………..
3-7-1 طرز تهیه ژل آگاروز……………………………………………………………………
3-7-2طرز تهیه بافرTBE(1X)…………………………………………………………….
3-8 بررسی بیان پروتئین……………………………………………………………………………..
3-9 نحوه آماده سازی جایگاه ژل…………………………………………………………………
3-10 روش تهیه بافر متراکم کننده…………………………………………………………….
3-11 روش تهیه بافر جداکننده ……………………………………………………………….
3-12 روش تهیه بافر تانک……………………………………………………………………..
3-13 آماده سازی الکتروفورز عمودی……………………………………………………………
3-13-1 آماده سازی پروتئین ………………………………………………………………
3-13-2 بارگذاری پروتئین………………………………………………………………….
3-14 رنگ آمیزی ژل.SDS-PAGE…………………………………………………………..
3-14-1 ساخت محلول رنگ………………………………………………………………
این مطلب را هم بخوانید :
3-14-2 نحوه رنگ آمیزی…………………………………………………………………..
3-15 خالص سازی پروتئین نوترکیب E.coli………………………………………………..
3-16 شکستن سلولها برای آزادسازی پروتئین………………………………………………..
3-17 خالص سازی با ستون نیکل سفارز……………………………………………………….
3-17-1 مواد مورد نیاز برای تهیه بافرهای خالص سازی………………………..
3-18 بردفورد……………………………………………………………………………………………
3-18-1 تهیه معرف بردفورد…………………………………………………………..
3-19 جداسازی LPS بروسلا ملیتنسیس……………………………………………………….
3-19-1 پروتکل جدا سازی LPS……………………………………………………
3-19-2 تهیه محلول دیالیز یا بافرفسفات…………………………………………..
3-20 سنجش غلضت LPS بروسلا ملیتنسیس……………………………………………..
3-20-1 تهیه LPS منحنی استاندارد………………………………………………….
3-21 روش کونژوگاسیون LPS با PorA…………………………………………………..
3-22 خالص سازی کونژوگاسیون………………………………………………………………..
فصل چهارم:(نتایج )
4-1 احیا باکتری نوترکیب PorA……………………………………………………………….
4-2 استخراج DNA
پلاسمیدی ……………………………………………………………….
4-3 بررسی بیان پروتئین …………………………………………………………………………..
4-4 خالص سازی پروتئین نوترکیب PorA………………………………………………..
4-5 بردفورد…………………………………………………………………………………………….
4-6 جداسازی LPS بروسلا ملیتنسیس………………………………………………………
4-7 سنجش غلظت LPS بروسلا ملیتنسیس………………………………………………
4-8 کونژوگاسیون LPS باPorA………………………………………………………………
فصل پنجم: (بحث)…………………………………………………………………………………..
نتیجه گیری……………………………………………………………………………………………….
منابع و ماخذ …………………………………………………………………………………………..
فهرست جدول ها
جدول1-1 طبقه بندی بروسلا……………………………………………………………………………………………
جدول 1-2 مقایسه بیماری زایی گونه های مهم بروسلا……………………………………………………….
جدول1-3 فراوانی شکایات بیماران مبتلا به بروسلوز بستری…………………………………………………
جدول1-4 فراوانی بعضی از یافته های بروسلوز طی چند فقره مطالعه…………………………………….
جدول 3-1 بافر جدا کننده 12%…………………………………………………………………………………………
جدول3-2 بافر متراکم کننده 6%…………………………………………………………………………………………
جدول3-3 بافر تانک………………………………………………………………………………………………………..
جدول3-4 تهیه معرف بردفورد………………………………………………………………………………………….
جدول3-5 تهیه معرف مورد استفاده در سنجشLPS…………………………………………………………..
فهرست شکل ها
شکل1-1 انواع سلولهایی که توسط باکتری بروسلا آبورتوس در میزبان طبیعی و در میزبان تصادفی درگیر میشوند…………………………………………………………………………………………………………………….
شکل1-2 شکل فرضی از تعاملات باکتری بروسلا آبورتوس با ماکروفاژ……………………………………
شکل 3-1 الکتروفورز با ژل پلی اکریل آمید…………………………………………………………………………..
شکل 4-1 کشت پارویی……………………………………………………………………………………………………..
شکل 4-2 DNA پلاسمیدی……………………………………………………………………………………………..
شکل4-3SDS-PAGE,PorA ………………………………………………………………………………………..
شکل 4-4 باند خالص سازی شده PorA……………………………………………………………………………..
شکل 4-5 معادله منحنی استاندارد برای سنجش غلضت پروتئین خالص سازی شده PorA………..
شکل4-6 باندهای LPSبروسلا ملیتنسیس…………………………………………………………………………….
شکل 4-7 معادله منحنی استاندارد سنجشLPS…………………………………………………………………..
چکیده
بروسلوز یکی از پنج بیماری عفونی مشترک بین انسان و دام است که در اثر آلودگی با باکتری های جنس بروسلا به وجود می آید . بروسلاها ، باکتری های کوچک ، غیر متحرک ، گرم منفی کوکوباسیل و درون سلولی اختیاری که در طیف وسیعی از حیوانات ایجاد بیماری می کنند . بروسلا آبورتوس و بروسلا ملی تنسیس عمده ترین گونه های عامل بروسلوز انسانی هستند. واکسنهای بروسلوز حیوانی شامل باکتریهای غیر فعال شده و یا سویه های زنده تخفیف حدت یافته دو مشکل اساسی در انسان ایجاد می کنند: نخست آنکه گاهی ایجاد بیماری مینمایند و دوم آنکه با واکنشهای ازدیاد حساسیت ناخواسته همراه اند. در همین راستا در سالهای اخیر ایمنی زایی با آنتی ژنهای مختلفی از گونه های بروسلا به شکل مونووالان طبیعی کونژوگه و یا نوترکیب مورد مطالعه و بررسی قرار گرفته است.از بین عوامل ویرولانس این ارگانیسم ،لیپوپولی ساکارید(LPS) بعنوان عامل ویرولانس اصلی شناخته شده است و سویه های جهش یافته و فاقد این جزء از دیواره سلولی، فاقد ویرولانس و توان بقای درون سلولی هستند.همچنین LPS به لحاظ ایمونولوژیک آنتی ژن اصلی سطح سلولی بروسلا محسوب میشود. به همین دلیل امروزه استفاده از LPS بروسلا به دلیل داشتن خواص آنتی ژنیک و ایمونوژنیک قوی جهت طراحی و تولید یک واکسن موثر انسانی بسیار مورد ارزیابی و مطالعه قرار میگیرد.امروزه پژوهش های متعددی در زمینه واکسن های زیر واحدی مونووالانت و یا کونژوگه ،با جایگزینی اجزاء دیگر باکتری از جمله پروتئین های غشاء خارجی جهت ایجاد پاسخ های ایمنی وابسته به لنفوسیتTصورت گرفته است وزیکول غشاء خارجی مننگوکوک(OMV) متشکل از پروتئینهای کلاس 1 تا 4،فسفولیپید پلی ساکارید کپسولی و لیپواولیگوساکارید میباشد،این ماکرومولکول در خلال سیر رشد باکتری در بدن میزبان رها میشود و پژوهش ها نشان میدهد که نقش عمده ای را در القائ ایمنی حفاظت بخش پس از ابتلا به بیماری دارد.از مهمترین اجزائ این ماکرومولکول میتوان به PorA،از خانواده کلاس1 پروتئین غشائ خارجی اشاره نمود که توانایی ایجاد پاسخ های باکتریسیدی را دارد. علاوه بر این وجود سایر ترکیبات از جمله لیپوالیگوساکارید و فسفولیپیدها،دارای خاصیت آدجوانتی بوده و پاسخ حفاظتی مناسبی را در انسان ایجاد مینمایند.
در این مطالعه ویال لیوفلیزه، حاوی porA ای که داخل E.coli کلون شده بود احیا گردید سپس برای اطمینان از اینکه porA روی پلاسمید باکتری کلون شده است استخراج DNA پلاسمیدی انجام شد.در مرحله ی بعد بیان پروتئین porA انجام گردید و برای شناسایی و بررسی کیفیت و کمیت پروتئین ، با روش SDS-PAGE بررسی شد. برای بیشترین بیان ،خالص سازی پروتئین با ستون کروماتوگرافی (نیکل – سفاروز) انجام گردید وسپس با انجام بردفورد غلظت پروتئین بدست آمد.در مرحله ی بعد LPS بروسلا ملیتنسیس جداسازی گردید و برای بررسی کیفیت و کمیت آن با روش SDS-PAGE بررسی شد وسپس با انجام ازمایش غلظت LPS بدست آورده شد.در نهایت LPS بروسلا ملیتنسیس با porA نیسریا کونژوگه گردید.
بیشترین بیان پروتئین porA در ساعت چهارم و پنجم در محدوده ی باند 65KD مشاهده شد . پس از خالص سازی پروتئین یک باند تک در محدوده ی 65KD مشاهده گردید و با انجام بردفورد غلظت پروتئین porA ،5 میکروگرم بر میلی لیتر بدست آمد.رویSDS-PAGE باندهای LPS مشاهده شد .با انجام ازمایش غلظت LPS ، 97/3میکروگرم برمیلی لیتر بدست آمد.
کلمات کلیدی:لیپوپلی ساکارید ، بروسلا ملیتنسیس، نیسریا مننژیتیدیس، وزیکول غشای خارجی (OMV) ،porA
فصل اول