مدیریت تحصیلات تکمیلی پردیس خودگردان دانشگاه دانشکده علوم پایه گروه زیست شناسی پایان نامه جهت اخذ درجه کارشناسی ...

۴-۳- بررسی بیان ژن———- ۳۱
۱-۴-۳- مشخصات توالی ژن PFK-1————- 31
2-4-3- طراحی پرایمرها——- ۳۵
۳-۴-۳- آماده سازی پرایمر—– ۳۵
۵-۳- استخراج RNA:———- 36
1-5-3- استخراج RNA از نمونه های تازه کبد توسط کیت Geneall Hybrid Rtm
1-5-3- بررسی کمیت و کیفیت RNA  استخراج شدهبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد————– ۳۸
۶-۳- سنتز cDNA————
1-6-3- سنتز cDNA توسط کیتThermo SCIENTIFICبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—-
۷-۳- واکنش های PCR——–
1-7-3 – PCR شیب دمایی—– ۴۱
۲-۷-۳- PCR معمولی——— ۴۳
۸-۳- الکترفورز————— ۴۵
۱-۸-۳ – مواد مورد نیازجهت تهیه ژل الکتروفورز—- ۴۵
۱-۱-۸-۳- آگارز————– ۴۵
۲-۱-۸-۳- اتیدیوم بروماید—— ۴۶
۳-۱-۸-۳- لودینگ بافر——— ۴۶
۴-۱-۸-۳-طرز تهیه محلول Tris-Hcl————-
4-1-8-3- شناساگرهای اندازهDNA————–
9-3- روش کار با ژل الکترفورز— ۴۷
۱۰-۳- رسم منحنی استاندارد:— ۴۸
۱۰-۳- واکنش Real-Time PCR—————-
11-3- Threshold و مقدار CT:–
12-3- تعیین توالی محصولات  (Direct Sequencing) PCRبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد———
۱۰-۲-۳- آنالیز بیان ژن——– ۵۲
۱۳-۳- تجزیه وتحلیل داده ها—- ۵۲
فصل چهارم: نتایج و بحث
۱-۴- جمع آوری نمونه :——– ۵۴
۲-۴- بررسی نتایج وزن موشهای مورد مطالعه——- ۵۴
۳-۴- بررسی نتایج گلوکز ناشتای سرم موشهای مورد مطالعهبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد———- ۵۶
۵-۴- نتایج استخراج RNA:—–
6-4- نتایج حاصل ازساخت cDNA بر روی ژل آگاروزبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد————— ۵۹
۷-۴-  نتایج تعیین غلظت و کیفیت RNA توسط اسپکتروفتومتریبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—- ۶۱
۱-۷-۴-  نتایج مربوط به PCR شیب دمایی——– ۶۱
۸-۴- نتایج منحنی استاندارد—- ۶۲
۱-۸-۴- منحنی استاندارد ژن TBP—————
2-8-4-منحنی استاندارد ژن PFK-1————-
9-4- نتایج واکنش  Real Time PCR————-
1-9-4- تکثیر ژنPFK———
2-9-4-تکثیر ژن TBP———
10-4- ارزیابی  کارایی تکثیر ژنهای مور مطالعه از طریق آنالیز منحنی ذوب:—— ۶۶
۱-۱۰-۴- منحنی تغییرات ذوب بر حسب دمای ژن  PFKبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد———–
۲-۱۰-۴-منحنی تغییرات ذوب بر حسب دمای ژن TBPبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد————-
۱۱-۴-  آنالیز منحنی ذوب ژن PFK————–
12-4-آنالیز منحنی ذوب ژن TBP—————
13-4- نتایج حاصل از Real timePCR ژن PFK 1 بر روی ژل آگارزبلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد— ۷۰
۱۴-۴- نتایج بررسی بیان ژن PK—————- 70
15-4- بحث:-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد ۷۱
۱۶-۴- پیشنهادات————- ۷۳
منابع:-بلافاصله پس از پرداخت لینک دانلود فایل در اختیار شما قرار می گیرد—— ۷۵
چکیده:
دیابت قندی یکی از مشکلات مهم پزشکی در همه کشورها می‌باشد. امروزه، درد و رنج انسان نه تنها در مورد این بیماری به خودی خود، بلکه شامل عوارض مرتبط با دیابت است.  گیاهان نشان دهنده منبع عظیمی از مکمل­های غذایی بالقوه مفید برای بهبود کنترل قند خون و جلوگیری از عوارض دراز مدت دیابت هستند. با توجه به تنوع گیاهان داروئی در ایران و با توجه به پتانسیل درمانی گیاهان داروئی و همچنین خطراتی که داروهای شیمیایی ممکن است در حال حاضر یا آینده برای بیماران ایجاد کنند، با بررسی تاثیر گیاهان دارویی در بیماری دیابت می­توان راه­های درمان مناسبی در پیش رو قرار داد.آنزیم  فسفو فروکتوکیناز -۱ از آنزیمهای سیتوزولی در مسیر گلیکولیز می باشد که نقش کلیدی در روند تنظیم گلیکولیز دارد.عوارض ناشی از نقص موروثی آنزیم pfk-1 در عضلات اسکلتی بصورت خستگی و کاهش توان حرکات عضلانی می باشد. در مواردی هم نقص آن باعث رشدسریع سلولهای سرطانی می شود. درتحقیق حاضر به  تاثیر عصاره هیدر الکلی برگ گیاه جغجغه (با توجه به دارا بودن اثرات ضدالتهابی، ضد میکروبی و ضد دیابتی ) بر بیان ژن pfk-1در موشهای دیابتی نوع ۱می پردازیم.
در این مطالعه ۴۵ سر موش صحرایی نر به طور تصادفی در سه گروه شاهد سالم، شاهد دیابتی و دیابتی تحت تیمار تجویز عصاره جغجغه تقسیم شدند. با تزریق استرپتوزوتوسین (mg/kg 60) در موش­های صحرایی نر (۳۰۰-۱۵۰ گرم) دیابت نوع ۱ ایجاد شد.گروه دیابتی تحت تیمار به صورت روزانه (mg/kg 300) عصاره برگ گیاه جغجغه را به صورت گاواژ به مدت ۳۰ روز دریافت نمودند. گروه شاهد سالم و شاهد دیابتی آب مقطر دریافت کردند. سپس در روز قبل از تجویز عصاره و روزهای ۱۵ و ۳۰ بعد از تجویز عصاره میزان گلوکز خون اندازه ­گیری شد و بیان ژن PFK-1 بافت کبدی توسط روش Real-Time PCR بررسی گردید. نتایج نشان داد گلوکز خون در روز ۱۵کاهش می یابد اما بین گروه شاهد دیابتی و دیابتی تحت تیمار تفاوت معنی داری مشاهده نشد میزان بیان ژن PFK در گروه دیابتی تحت تیمار در روز ۱۵ تفاوت معنی داری نسبت به شاهد دیابتی ندارد در بین گروه ها تفاوت معنی داری برای بیان ژنPFK  وجود ندارد. بنابراین تجویز عصاره هیدروالکی گیاه جغجغه بر بیان ژن فسفوفروکتوکیناز -۱ در بیماران دیابتی نوع ۱ بی تاثیر می باشد.
فصل اول: مقدمه و کلیات
۱-۱- مقدمه

دیابت یک بیماری ساده نیست، بلکه سندرم پیچیده­ای است که بارزترین ویژگی آن افزایش قند خون است. بنابراین، بیماران دیابتی هر چند در یک ویژگی به هم می­مانند، اما هم از نظر بالینی و هم از نظر آسیب شناسی و ژنتیکی ناهمگون هستند. این بیماری در سال ۱۹۸۰ میلادی این گونه تعریف شد: گروهی از نارسایی­ها که ویژگی اصلی آن­ها افزایش بیش از اندازه­ گلوکز در خون و کاهش تحمل به گلوکز است و پیامد کمبود انسولین یا نارسایی در کارکرد انسولین و یا آمیزه­ای از این دو است. عوارض ناشی از دیابت در ۲۵% موارد، نارسایی کلیه و در ۵۰% موارد قطع عضو و نابینایی است (Tehranipour et al., 2008). گیاهان دارویی از قدیم به منظور کنترل قند خون، کاهش عوارض، افزایش کیفیت و طول زندگی در افراد دیابتی به کار گرفته شده است. با توجه به این که گیاهان دارویی نسبت به داروهای شیمیایی اثر جانبی کمتری دارند، بنابراین پژوهشگران به دنبال یافتن ترکیبهای گیاهی برای درمان و یا پیشگیری از این بیماری هستند. گیاه جغجغه (Prosopis farcta) گیاهی با خواص ضد التهاب و ضد دیابتی است. اهمیت فعالیت فسفوفروکتوکیناز ۱ نه تنها از این جنبه است که واکنشی به شدت انرژی زا را کنترل می کند بلکه اولین مرحله در واکنش­های گلیکولایزیز است که واکنش یکطرفه بوده و برگشت ناپذیر است. این باعث می­گردد که کنترل شدیدی بر روی میزان گلوکز و دیگر مونوساکاریدها مانند گالاکتوز و فروکتوز بوجود آید هدف از مطالعه حاضر بررسی اثر عصاره هیدروالکلی برگ گیاه جغجغه بر میزان بیان ژن پیروات کیناز و کاهش سطح گلوکز خون در موش‌های صحرایی 

نر دیابتی می‌باشد.

۲-۱- کلیات تحقیق
۱-۲-۱- دیابت
دیابت ملیتوس شامل بیماریهای متابولیکی است که مشخصه آن افزایش مزمن قند خون و اختلالات متابولیسم کربوهیدرات­ها، چربی­ها و پروتئین­ها می باشد. این بیماری در نتیجه­ی وجود نقص در ترشح انسولین، عملکرد انسولین یا هر دو ایجاد می­گردد. افزایش مزمن قند خون در حالت ناشتا یا بعد از خوردن غذا مسئول عمده­ی  عوارض کوتاه اثر و بلند مدت این بیماری می باشد که تمام سیستم­ها و اندام­های بدن را تحت تاثیر قرار میدهند. این بیماری شایعترین علت بیماریهای کلیوی مرحله نهایی، موارد جدید نابینایی و قطع اندام تحتانی غیرترومایی را به خود اختصاص می­دهد. بیماری قلبی عروقی در افراد دیابتی ۲ تا ۴ برابر نسبت به افراد عادی شایعتر  است و در افراد بالاتر از ۲۵ سال ۱۸٪ تمام بیماری­ها را شامل می­ گردد.
۲-۲-۱- انواع دیابت
دیابت به دو دسته­ی اصلی وابسته به انسولین (دیابت نوع ۱) و دیابت غیر وابسته به انسولین (دیابت نوع ۲) تقسیم می­شود. همچنین گونه دیگر با نام دیابت بارداری (Gestational) که در دوران بارداری بروز کرده و پس از آن بهبود می یابد.
در دیابت نوع ۱  که از انواع شایع بیماریهای  خود ایمن  است سیستم ایمنی بدن سلول­هایβ سازنده انسولین در پانکراس را تخریب می­ کند. این نوع دیابت بسیار سریعتر از سایر فرم­های دیابت پیشرفت می­ کند و معمولا در کودکان و نوجوانان بالغ، بعضی اوقات در جوانان بالغ دیده می­شود. این بیماران باید بطور منظم انسولین تزریق کنند. همچنین به این دیابت، دیابت جوانان یا دیابت ملیتوس وابسته به انسولین نیز می­گویند. اما این اصطلاح نمی­تواند کاملا دقیق باشد برای اینکه این کودکان می­توانند به سایر فرم­های دیابت مبتلا شوند. یک فرم دیگر از دیابت نوع ۱ که در سنین بالا معمولا بعد از سی سالگی رخ می­دهد LADA[1]گفته می­شود. افراد مبتلا به این نوع دیابت فاقد شاخص­های ایمونولوژیکی هستند که حاکی از روند تخریب خود ایمنی سلول­های β باشد با  این وجود این بیماران بواسطه­ی مکانیسم­های نامشخصی دچار کمبود انسولین می­شوند. گاهی اوقات بیماران مبتلا به دیابت اتوایمیون به دلیل افزایش وزن و فاکتورهای ژنتیکی به انسولین مقاوم می­شوند به این شرایط دیابت مضاعف[۲]گفته می­شود.

فاکتورهای قابل کنترلی مانند شیوه زندگی ناسالم، پرخوری، کم تحرکی، چاقی، می­توانند توانایی بدن را در استفاده از انسولین مختل کنند. همچنین فاکتورهای غیر قابل 

مطلب دیگر :

فایل رایگان پایان نامه روانشناسی : سازگاری اجتماعی - سازین : تجربه های کارآفرینی و نوآوری

کنترلی مانند ژنتیک، تاریخچه­ی خانوادگی دیابتی، سن نیز در این فرایند درگیرند. فرم­های متابولیک دیابت شامل دیابت بارداری و دیابت نوع ۲ می­باشند. بیماری دیابت بارداری، فرم موقت دیابت است و در دوران بارداری در هر زن غیردیابتی می ­تواند رخ دهد. تغییرات هورمونی، همراه با وزن زیاد و تاریچه خانوادگی دیابتی در ابتلا به این بیماری نقش دارند. بر اساس گزارش موسسه آمریکایی دیابت حدود ۴% از زنان در طول دوران بارداری به این فرم از دیابت مبتلا می­شوند. این بیماری می ­تواند مشکلاتی مانند تولد جنین نارس، یرقان و مشکلات تنفسی برای مادر و کودک ایجاد کند. این بیماری بعد از زایمان بهبود می­یابد ولی مادر و کودک در سنین بالاتر استعداد ابتلا به دیابت نوع ۲ را دارند (Riaz, 2009). دیابت نوع ۲ شایعترین نوع دیابت بوده و۹۰٪ موارد بیماری دیابت را به خود اختصاص داده است. شیوع دیابت نوع ۲ پیوسته در حال افزایش است و میزان بروز دیابت نوع ۲ در کودکان تقریبا ده برابر شده است.

۱-۲-۳- علائم بروز دیابت
علایم بروز دیابت، به نوع دیابت و اینکه فرایند بیماری در چه مرحله­ای باشد بستگی دارد. مبتلابان به دیابت نوع ۱ معمولا با علایم حاد کلاسیک هیپرگلیسمی شامل: پرنوشی، پرادراری، کاهش وزن و به میزان کمتر پرخوری، تاری دید و خارش مراجعه می­ کنند. در بیست و پنج درصد مبتلایان نشانه بروز بیماری برای اولین بار کتواسیدوز دیابتی است. در مبتلایان به دیابت نوع ۲ اغلب چندین سال قبل از تشخیص بیماری وجود دارد. معمولا علائم نسبت به نوع ۱ کمتر به صورت حاد بروز می­ کند و ممکن است در افراد مسن­تر همراه با لتارژی و خستگی دیده شود. افزایش مزمن قند خون ممکن است با اختلال رشد، حساس بودن به عفونتها و ترمیم تاخیری زخم همراه می­باشد.
برخلاف بیماری­های تک ژنی، بروز بیماری توسط آلل موتانت در یک جایگاه ژنی تحت تاثیر قرار می­گیرد، در بیماری­هایی شبیه به دیابت نوع ۲ بروز بیماری به چندین جایگاه ژنی که دارای اثر کوچک تا متوسط هستند، بستگی دارد. دیابت نوع ۲، بیماری چند عاملی است که در آن ژنها نه تنها با یکدیگر، بلکه با عوامل محیطی نیز در تعامل اند. این احتمال وجود دارد که فعالیت و ترشح انسولین هر دو تحت کنترل واریانت­های ژنتیکی در جایگاه­های ژنی مختلف باشند. براساس مدل مولتی فاکتوریال، استعداد ابتلا به بیماری می ­تواند به وسیله­ی ترکیبی از واریانت­های ژنتیکی متعدد و فاکتورهای محیطی تعیین شود. استعداد ژنتیکی افراد لزوما باعث سندروم آشکار نمی­ شود مگر اینکه آنها در معرض عوامل محیطی ویژه­ای قرار گیرند.
۱-۲-۴- درمان دیابت
کمیته متخصصین سازمان بهداشت جهانی در سال ۱۹۸۰ توصیه کرده است که روش­های سنتی درمان دیابت، بیشتر مورد بررسی قرار گیرند، زیرا مرگ ناشی از دیابت در حال افزایش بوده و همچنین مشکلاتی در استفاده از داروهای رایج فعلی وجود دارد (Suba et al., 2004).  به طور سنتی در طول تاریخ از گیاهان متفاوتی برای کاهش قندخون و بهبود اثرات دیابت، استفاده شده و در طب سنتی ایران و سایر کشورهای جهان، اطلاعات کمابیش مفصلی در این رابطه به چشم می­خورد. داروهای گیاهی به خاطر کم بودن اثرات جانبی، در دسترس بودن، هزینه نسبتا کم و مؤثر بودن­ آنها، به طور وسیع در سرتاسر جهان مورد تجویز واقع می­شوند (Venkates et al., 2003).
چندین نوع داروی کاهش دهنده گلوکز وجود دارد که از طریق مکانیزم­های مختلف، اثرات ضد­دیابتی خود را اعمال می­ کنند. از جمله این مکانیسم­ها می­توان به تحریک ترشح انسولین توسط داروهای خانواده سولفونیل اوره و مگلیتینیدها (Meglitinides)، افزایش جذب محیطی گلوکز توسط بای­گوانیدها (Biguanides) و تیازولیدین­دیون­ها (Thiazolidinediones)، به تأخیر انداختن جذب کربوهیدرات­ها از روده توسط مهارکننده­ های آلفا_ گلوکوزیداز، کاهش گلوکونئوژنز کبدی توسط بای­گوانیدها و تیازولیدین­دیون­ها (Modi, 2007)، افزایش غلظت سرمی GLP-1[1] و کاهش خالی شدن معده توسط آنالوگ­های پپتیدی جدید مانند اگزناتیدها (Exenatide) و لیراگلوتیدها (Liraglutide) و مهارکننده­ های [۲]DPP-4 اشاره کرد (Hui et al., 2005). این درمان­ها دارای معایبی نظیر توسعه­ی مقاومت دارویی، اثرات جانبی و حتی سمی بودن تا کمبود پاسخ­دهی می­باشند. به عنوان مثال سولفونیل اوره­ها در مدت ۶ سال کارایی خود را در ۴۴ درصد بیماران از دست می­ دهند. ۳/۲ از داروهای تجویز شده برای کودکان مؤثر نیستند ( Michal et al., 2005 and Defronzo, 1999). به علاوه هیچ کدام از این داروهای کاهش دهنده­ی گلوکز به طور مؤثر افزایش لیپیدهای خون را کنترل نمی­ کنند (Derek2001). با شیوع در حال افزایش دیابت در جمعیت روستایی و به علت اثرات نامساعد داروهای صناعی، یک نیاز آشکار برای توسعه­ی منابع گیاهی طبیعی برای داروهای ضد دیابت وجود دارد (Venkatesh et al., 2003). همچنین اثرات جانبی داروها و تداخلات آنها با یکدیگر که در بدن انسان یا در هنگام آزمایش­های مختلف آشکار می­شود نیز مسأله مهمی است که باید مدنظر باشد (Bathaie et al., 2001). مواد مؤثر موجود در گیاهان دارویی مختلف، از طریق مکانیزم­های متفاوتی قادر به کاهش قند خون هستند. عمده­ی این مکانیزم­ها عبارتند از: افزایش ترشح انسولین، فعال کردن مسیر کاتابولیسم گلوکز، مهار یا غیر فعال کردن مسیر گلوکونئوژنز، هدایت گلوکز به داخل سلول، جذب گلوکز آزاد و ممانعت از اتصال آن به پروتئین­ها، افزایش ظرفیت آنتی­اکسیدانی و ممانعت از آسیب­زایی اکسیدان­های تولید شده در مسیرهای مختلف که ممکن است ناشی از ازدیاد گلوکز و تولید محصولات نهایی گلیکه یا سایر مسیرهای متابولیک باشد و سرانجام ممانعت از جذب گلوکز از روده. (بطحایی و همکاران، ۱۳۹۱). یکی از مهمترین مسائل مورد توجه در علوم پزشکی و حتی تجارت جهانی به تولید، فرآوری و استفاده از گیاهان دارویی می­باشد (Pirzad et al., 2006).  به ­طوریکه بعد از اسلحه سازی دومین صنعت پول ساز بزرگ جهان تولید و تجارت داروئی می­باشد (Riazi,1997).در سال ۲۰۰۸ سرمایه در گردش بازار جهانی گیاهان دارویی تا سال ۲۰۰۵ بالغ بر ۵ تریلیون دلار گردد (امید بیگی، ۱۳۷۹). چین سالانه ۸ میلیارد دلار از تولید گیاهان دارویی در­آمد کسب می­ کند. در ایران با وجود حجم عظیم منابع گیاهان دارویی، بخشی از نیاز جامعه از کشورهایی مثل هند وارد می­شود (افشار، ۱۳۸۵). در حال حاضر سطح زیرکشت گیاهان دارویی در ایران ۹۱ هزار هکتار و میزان تولید این محصولات ۱۰۰ هزار تن است.

دانشکده علوم دریایی و اقیانوسی پایان نامه دوره کارشناسی ارشد زیست شناسی دریا – بوم شناسی ...

۲-۳-۵ روش شمارش تعداد تخم ها و نوزادان گاماروس . ۲۶
فصل سوم نتایج ۲۸
نتایج حاصل از ایستگاه های مختلف ۳۰
۳-۱ ایستگاه شماره ۱ ( ساحل دانشگاه) . ۳۰
۳-۲ ایستگاه شماره ۲ ( ساحل سنگی) . ۳۲
۳-۳ ایستگاه شماره ۳ ( پارکینگ ۱) . ۳۴
۳-۴ ایستگاه شماره ۴ ( پارکینگ ۳) ۳۶
۳-۵ ایستگاه شماره ۵( پارکینگ ۵) ۳۸
۳-۶ ایستگاه شماره ۶( پارکینگ ۶) . ۴۰
۳-۷ ایستگاه شماره ۷ ( شازده رودخانه) . ۴۲
۳-۸ ایستگاه شماره ۸ (دریاکنار) ۴۴
۳-۹ ایستگاه شماره ۹ ( خزرشهر) . ۴۶
۳-۱۰ ایستگاه شماره ۱۰( پارک لاله) . ۴۸
۳-۱۱ فراوانی گاماروس در ماه ها و ایستگاه های مختلف  ۴۸
۳-۱۲ طول و وزن گاماروس ۵۲
۳-۱۳ رابطه بین طول و وزن گاماروس ۵۴
۳-۱۴ توزیع فراوانی گاماروس های جفت شده در  ایستگاها و ماه های مختلف سال. ۵۵
۳-۱۵ هم آوری (تعداد تخم) گاماروس در  ایستگاه ها و ماه های مختلف ۵۷
۳-۱۶ توزیع فراوانی نسبت جنسی  گاماروس در  ایستگاه ها و ماه های مختلف . ۵۹
۳-۱۷ توزیع فراوانی نسبی گاماروس های بالغ و نابالغ در ایستگاه ها و ماه های مختلف ۶۰
۳-۱۸ پارامترهای محیطی و همسبتگی آنها با فراوانی گاماروس ۶۱
فصل چهارم بحث و نتیجه گیری ۶۴
۴-۱ بحث . ۶۵
۴-۲ نتیجه گیری نهایی ۶۹
۴-۳ پیشنهادات . ۶۹
منابع و مآخذ ۷۱
منابع فارسی.۷۱
منابع انگلیسی. ۷۳
ضمائم ۷۷
Abstract
چکیده:
به منظور بررسی تغییرات فصلی پراکنش و تنوع گاماروسها به تفکیک جنسیت در سواحل ، نمونه برداری بصورت فصلی در ده ایستگاه (از بابلسر تا فریدون کنار) به مدت یکسال ازمرداد ۱۳۹۲ لغایت اردیبهشت ۱۳۹۳ با کوادرات ۵۰×۵۰ سانتیمتر بصورت تصادفی و برداشت کامل تمامی نمونه ها در طول سواحل شنی انجام گرفت. در مطالعات صورت گرفته فقط گونه Pontogammarus maeoticus مشاهده شد. میانگین طول در نمونه های نابالغ و جنسهای نر و ماده بترتیب ۱/۴، ۵/۸ و ۳/۸ میلیمتر و وزن بترتیب ۰۰۶۸/۰، ۰۳۰۳/۰ و ۰۲۸۲/۰ گرم برآورد شد، نرها دارای طول و وزن بیشتری از ماده هستند، حداکثر طول نر و ماده در این گونه ۱۴ میلیمتربدست آمد از مجموع ۱۹۰۶ نمونه شمارش شده در آزمایشگاه ۶۷۳ (۳۰/۳۵ %) نر ، ۸۷۳ (۸۰/۴۵%) ماده ، ۳۶۰ (۹/۱۸%) نابالغ بدست آمد. نسبت جنسی (نر/ ماده ) در فصل بهار، تابستان، پاییز و زمستان به ترتیب( ۶۳/) ،(۹۳/) ،(۲۱/۱) و(۷۰/) بود. بیشترین نسبت جنسی با ۲۱/۱ در فصل پاییز (آبان) و کمترین نسبت جنسی با ۶۳/ در فصل بهار(ادیبهشت) مشاهده شد همچنین این نسبت جنسی  با اختلاف کم به نفع ماده ها می باشد.
فصل اول: مقدمه
۱-۱- مقدمه
دریای خزر یکی از پهنه های آبی بسته جهان به خاطر اهمیت اقتصادی و سیاسی جزء مناطقی است که برای کشورهای ساحلی اطراف آن بسیار با اهمیت است. در گذشته به نامهایی مانند خاواینسکی، دریای هیرکانیان، دریای جرجان (گرگان)، بحر مازندران بحر آبسکون و بحر قانیا خوانده می شد. این دریا دارای سه ناحیه شمالی، میانی، و جنوبی است. که مساحت هر ناحیه به ترتیب عبارتند ۹۱۹۴۲، ۱۳۷۸۱۲ و ۱۱۸۶۴۰ کیلومتر مربع است(۱۳). کشورهای روسیه، ترکمنستان، قزاقستان، ایران و جمهوری آذربایجان در حاشیه دریای خزر قراردارند. بیشترین عرض دریای خزر۵۵۴ کیلومتر و کمترین عرض آن حدود ۳۰۲ کیلومتر است. طول خطوط ساحلی دریای خزر در قسمت ایرانی حدود ۹۹۲ کیلومتر است(۱۵). ناحیه خزر جنوبی دارای مساحت حدود ۱۱۸۶۴۰ کیلومتر مربع، متوسط حجم آب آن ۴۸۳۰۰ کیلومتر مکعب، در بر گیرنده ۶۴ % حجم آب خزر است. حداکثر عمق ناحیه جنوبی ۱۰۲۵ متر و متوسط عمق آن ۳۰۰ متر است. میزان شوری خزرجنوبی ۱۳-۱۰ ppt (آب لب شور)، است. تولید اولیه ۴۱ mil. tons organic carbon/year است. طول خط ساحلی با احتساب جزایر ۷۰۰۰ کیلومتر، بدون احتساب جزایر ۵۵۸۰ کیلومتر است، که ایران ۷۲۵کیلومتر، آذربایجان ۶۰۰ کیلومتر، روسیه ۷۵۵ کیلومتر، قزاقستان ۲۳۰۰کیلومتر ، ترکمنستان ۱۲۰۰کیلو متر است(۱۵).

سواحل دریای خزر از نظر ژئو مور فولوژیکی به سواحل شمالی، سواحل شرقی، سواحل غربی و سواحل جنوبی تقسیم میشود. سواحل ایران در قسمت جنوبی دریای خزر قرار دارد که حدود ۷۰۰کیلومتر را شامل می شود. سواحل ایران را از نظر دانه بندی رسوب، می توان به سه دسته ماسه ای (سواحل گیلان و شرق مازندران) قلوه سنگی (غرب مازندران) و سیلتی – رسی (گلستان) تقسیم بندی کرد اما سواحل جنوبی دریای خزر بیشتر از نوع گلی و ماسه ای است که این حالت باعث میشود بستر حالت سست داشته باشد بنابر این فراوانی و تنوع گونه ای را کاهش می دهد(۴۶). ساحل جنوبی دارای خطوط ساحلی نسبتا مستقیمی است، که بریدگی کمی دارد، دلیل وجود بریدگی کم در سواحل جنوبی خزر، عمق زیاد دریا در این بخش می باشد. حاشیه ساحل در جنوب دریا، از رسوباتی که رودها آن را ایجاد نموده اند و نیز از تپه های ماسه ای تشکیل شده است. ساحل دریا در منطقه مازندران، رسوبی است و از خلیج گرگان به سمت غرب، جلگه ساحلی عریض می شود، به طوری که در شهرستانهای آمل و بابل به حداکثر عرض خود می رسد.


۲-۱- بررسی برخی از فاکتور های محیطی دریای خزر:
۱-۲-۱- تغییرات دما در دریای خزر
تغییرات دما در بین مناطق شمالی و جنوبی دریای خزر حدود ۱۰درجه سانتیگراد است. بنابر این در زمستان در مناطق شمالی آب یخ می بندد اما در مناطق جنوبی دما حدود ۹ درجه سانتیگراد است این اختلاف به علت تفاوت در عرض های جغرافیایی است که پایین ترین حد جنوبی آن عرض جغرافیایی ۳۶درجه و ۳۳دقیقه شمالی و بالاترین حد شمالی آن عرض جغرافیایی ۴۷درجه و ۷دقیقه شمالی است(۱۳).
۲-۲-۱- تغییرات شوری دریای خزر
تغییرات شوری تحت تاثیر آب رودخانه ها و عرض های جغرافیایی مختلف است که باعث تغییر درجه حرارت شده و مقدار شوری این دریا را تغییر می دهد. تغییرات شوری آب دریای خزر در قسمت شمالی بیشتر و درقسمت میانی و جنوبی نوسانات کمتری دارد. متوسط شوری کل آب دریای خزر حدود ۱۳ قسمت در هزار و آب آن لب شور است(۱۳).
۳-۲-۱- دریای خزر از نظر اکسیژن
تاعمق ۱۰۰۰متری، در قسمت جنوبی، دریای خزر دارای اکسیژن است. و در زمستان آب از اکسیژن اشباع می شود زیرا در فصل زمستان فیتو پلانکتون ها همچنان به فعالیت خود ادامه می دهند. در فصل تابستان به علت فر آیندهای اکسیدی میزان اکسیژن کم می شود، اما چون پدیده ترمو کلاین بیشتر مواقع اتفاق می افتد، میزان اکسیژن دوباره افزایش می یابد، بنابر این قسمت جنوبی دریای خزر محیط مناسبی برای پلانکتون ها و جانداران دریایی است(۱۳).
۳-۱- ناجور پایان
ناجور پایان گروهی ازسخت پوستان آبزی، به دلایل زیر در این پژوهش به عنوان الگو قرار گرفتند:
۱- راحت بودن دسترسی به آنها
۲- نقش آنها در غذای ماهی ها
۳- نقش آنها به عنوان شاخص آلودگی آب

۴- میزبان حد واسط برای انگلهای بسیاری از ماهی ها، پرندگان، و دوزیستان

مطلب دیگر :

ایستگاه تیوال در تالار وحدت رونمایی شد


جنس گاماروس به عنوان اعضای غالب دراکوسیستمهای آب شیرین، لب شور و دریایی محسوب می شود و نقش کلیدی درساختار و عملکرد جوامع آبزی دارد. همچنین گاماروسها به عنوان یک عضو انتقال کربن در زنجیره موادغذایی محسوب میشوند. در سواحل ایران گونه ی  Pontogammarus maeoticus  به عنوان گونه غالب دریا خزر است. در دریای خزر، ۹ راسته ازسخت پوستان شناخته شده است، که شامل ۵ خانواده و ۱۶ جنس می باشند این ۱۶ جنس نقش مهمی در زنجیره غذایی تاسماهیان، شاه‌ماهى‌، ماهى‌، قزل‌الا و بسیاری از پرندگان مختلف ازجمله فلامینگو و پاشله دارد(۳۰).
نام  Amphipodaاز دو کلمه ) amph ازواژه یونانی amphi=amphisبه معنای دوتا، دوجور، جدا) و کلمه pod (از واژه یونانی podos یا pous به معنی پا) تشکیل شده است و به معنی پاهای دو جور یا متفاوت است (۳۷). از تیره های بزرگ راسته دو جور پایان می توان سخت پوستان تیره گاماریده را نام برد، گاماریده ها جزء زیر راسته سخت پوستان عالی هستند و از مواد آلی و اجساد موجودات زنده تغذیه می کنند بنابراین می توانند نقش موثری در پاکیزگی محیط زیست داشته باشند این موجودات می توانند غذای موجودات آبزی نیزباشند، بیشتر آنها در دریا  ها و اقیانوسها و تعداد کمی نیز در آبهای شیرین زندگی می کنند (۱). ناجور پایان دارای پراکندگی گستر ده ای در دنیا هستند تا به حال حدود ۴۳۰۰ گونه از آنها را در قسمت های مختلف دنیا شناسایی کرده اند. پراکندگی زیادی  در نواحی ساحلی و بخش های عمیق دریاها و اقیانوسها و حتی آبهای شیرین نهر ها و رودخانه ها و دریاچه ها دارند. در رودخانه های سواحل جنوبی ایران در مناطقی که آب زلال و شفاف باشد بطور گسترده وجود دارند(۱). ناجور پایان نقش قابل توجهی دراکوسیستمهای آب شیرین ودیگر اکوسیستمهای آبی داخلی دارند وحساسیت زیادی نسبت به تخریب محیط زیست ازخودنشان می دهند(۲۶).
تعدادی از گونه های ناجور پایان بعنوان شاخصی برای آلودگی آب بحساب می آیند زیرا نسبت به آلودگیهای  نفتی، و تجمع فلزات سنگین، حساسیت بالایی از خود نشان می دهند (۱۶). ویژگی هایی مانند ارزش غذایی بالای آنها که دارای بیش از ۴۰ درصد پروتئین هستند، سرعت سریع تولید مثل، پراکندگی گسترده در آبهای ایران، دارا بودن موادی مانند: ویتامین ها، آنزیم ها و مواد معدنی مختلف مانند: منیزیم و کلسیم، رنگدانه کاروتنوئیدی، اندازه مناسب برای تغذیه ماهیها و حضور همیشگی آنها در محیط های آبی باعث شده است که گاماریده ها در پرورش ماهی از اهمیت ویژه ای بر خوردار باشند (۱۴). جنس گاماروس در مراحل اولیه رشد آبزیان نقش مهمی دارد زیرا دارای منابع پروتئینی و رنگدانه های کاروتنوئیدی است.گاو ماهیان از گاماروس ها تغذیه می کنند و چون فیل ماهی نیز از گاوماهی تغذیه می کند تغییر در میزان زیست توده گاماروس می تواند تغییرات عمده ای در جمعیت گاو ماهی و فیل ماهی های دریای خزر ایجاد کند(۲۷).
بعضی از ناجورپایان مانند اعضای خانواده Caprelidea دارای بدنی باریک و اسکلتی با شکمی تحلیل رفته هستند که به کمک پاهای گیره مانند خود می توانند از گیاهان آبزی بالا روند، گروه دیگری از ناجورپایان در داخل زیستگاه تونل مانند هستند و با اتصال شاخکهای خود به بستر و منقبض کردن مفاصل موجود در شاخک های خود می توانند به جلو حرکت کنند(۲۱). ناجور پایان از نظر شکل بدنی دو حالت دارند، حالت دراز و کشیده (شکل۱-۳-۱)، حالت فشرده ودارای حرکت سریع(شکل۱-۳-۲).
دوجورپایان دارای اهمیت اقتصادی واکولوژیکی هستند و از نظر فیزیو لوژیکی و اکولوژیکی تفاوت زیادی بین گونه های آنها وجود دارد بنابراین اولین مرحله در تکثیر این جانوران شناختن گونه های آن هاست .همچنین دو جور پایان می توانند میزبان حد واسط بعضی از انگل ها باشند بنابر این برای کنترل انگل ها، شناسایی دو جور پایان دارای اهمیت است. تا به حال تعداد ۱۱ گونه از دو جور پایان در دریای خزر گزارش شده است(۲).
۱-۳-۱- مشخصات ناجور پایان
بدن از سه قسمت سر،سینه، شکم ساخته شده است. سر نسبتا کوتاه است(۳۴). سینه دارای ۷ بند و شکم از ۶ بند ساخته شده است و انتهای شکم به تلسون ختم می شود. در قسمت سر آنتن های I وII، ماندیبول ها، و ماکسیل های I وII و یک جفت چشم مرکب قرار دارد. آنتنI  سه بندی و دارای یک شاخه فرعی است که چندین بند دارد ودر بعضی از خانواده ها دیده نمی شود(Corphilidae). آنتن دوم پنج بندی است .هفت جفت پای سینه ای دارند(شکل های ۱-۳-۳ و ۱-۳-۴). هر کدام از پاهای سینه ای، خود از ۷ قطعه که بترتیب شامل Coxale plate،Basis ،Ischium ، Merus، Carpus، Propodus،Dactylus  تشکیل شده است. بند ششم در بعضی از ناجور پایان پهن شده و گلابی شکل است، بند هفتم ناخن می تواند روی بند ششم مانند تیغه چاقو خم شود(شکل۱-۳-۴). به بند اول پاهای سینه ای ۳ و ۴ و ۵ آبششهای برگ مانند متصل شده اند. در مادهای بالغ تخمدانها تشکیل کیسه تخم[۱] را میدهد که هم تخم و هم نوزاد درون آن جای می گیرد(۳).
آبششها در دوجورپایان می توانند بصورت ساده، و یا پیشرفته که دارای پیچ خوردگی، بصورت لبه دار با زائده داخلی باشند. طرز قرار گرفتن آبشش ها و صفحات نگهدارنده تخم در گروه ها و گونه های مختلف متفاوت است(۵۲). بررسی هایی که در مورد آبشش های گرو ههای مختلف دو جور پایان، از جمله دو جور پایان آب شیرین انجام گرفته نشان می دهد که این آبششها بیشتر نقش تنظیم اسمزی [۲]  دارند تا نقش تنفسی(۲۳).
دوجورپایان دارای پاهای شکمی[۳] و پاهای دمی[۴] می باشند. روی بندهای جلویی شکمی سه جفت پاهای شنا[۵] قرار می گیرد که برای تهویه وشنا تناسب یافته اند دوشاخه ای و دارای تارچه هستند و با حرکت خود باعث بهبود جریان تنفسی در اطراف آبششها می شوند. به سه بند شکمی انتهایی پاهای پرشی ۵متصل است که در انواع آبزی سوزنی شکل است متمایل به عقب قرار می گیرد ودرجهش جانور، حفر کردن یا شنا کردن کاربرد دارد(۲۱). درپای شکمی سوم تناسب طولی بین شاخه داخلی[۶] و شاخه خارجی[۷] و دارا بودن تاژک و خار در شاخه خارجی[۸]  می تواند در طبقه بندی جاندار نقش داشته باشد(۳).
تلسون در قسمت انتهایی آخرین بند شکمی قرار دارد که بصورت آزاد و دو قسمتی است و از لحاظ شکل متنوع می باشد و در طبقه بندی جاندار دارای اهمیت است(۲۱) (شکل۱-۳-۴).
[۱] Marsupid

تحصیلات تکمیلی پایان نامه کارشناسی ارشد در رشته­ زیست شناسی- ژنتیک عنوان: بررسی رابطه ی پلی مورفیسم ...

۳ـ۴ـ مراحل استخراج  ۱۷
۳ـ۵ـ واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR). 18
3ـ۶ـ بررسی پلی مورفیسم rs2254298 ژن OXTR.
3ـ۷ـ فرایند انجام واکنش PCR.
3ـ۷ـ۱ـ  مواد و وسایل مورد نیاز برای انجام PCR.
3ـ۷ـ۲ـ محلول های مورد نیاز برای واکنش PCR
3ـ۷ـ۳ـ روش کار۲۰
۳ـ۷ـ۴ـ مراحل انجام PCR.
3ـ۸ـ RFLPـPCR
3ـ۸ـ۱ـ مراحل و مواد مورد نیاز برای انجام RFLP.
3ـ۸ـ۲ـ آنزیم BsrӀ.
۳ـ۸ـ۳ـ روش کار۲۳
۳ـ۹ـ مراحل و مواد مورد نیاز برای انجام الکتروفورز.۲۴
۳ـ۹ـ۱ـ مواد مورد نیاز.۲۴
۳ـ۹ـ۲ـ تهیه ژل آگارز ۳ درصد ۲۴
۳ـ۱۰ـ بررسی پلی مورفیسم rs53576
3ـ۱۰ـ۱ـ آنزیم BamHӀ.
۳ـ۱۰ـ۲ـ روش کار. ۲۶
۳ـ۱۱ـ آنالیز آماری۲۶
فصل چهارم: نتایج.۲۷
۴ـ۱ـ اطلاعات بیماران و افراد سالم.۲۸
۴ـ۲ـ بررسی پلی مورفیسم rs2254298 در ژن گیرنده اکسی توسین ۲۹
آنالیز آماری ۳۰
۴ـ۳ـ بررسی پلی مورفیسم برای (A/G) ژن OXTR
4ـ۳ـ۱ـ آنالیز آماری. ۳۳
فصل پنجم: بحث و نتیجه گیری و ارائه پیشنهادات۳۴
۵ـ۱ـ بحث۳۵
۵ـ۲ـ پیشنهادات. ۳۷
مراجع ۳۸
چکیده:
پیش زمینه: با مطالعات بر روی دوقلوها می توان به نقش عوامل ژنتیکی در اسکیزوفرنی پی برد. اسکیزوفرنی را می توان یکی از مخرب ترین اختلالات روانی برشمرد. افراد مبتلا، رفتارهایی خشن بروز می دهند. اکسی توسین نقش بسزایی در بروز رفتارهای اجتماعی_احساسی دارد. در مطالعه حاضر، هدف ما یافتن رابطه ای بین پلی

 مورفیسم ژن گیرنده اکسی توسین و خطر ابتلا به اسکیزوفرنی بود.

مطلب دیگر :

بایگانی‌های فناوری - ایده پردازان فردا : ایده های نو برای زندگی بهتر


روش ها: در این مطالعه، DNA از نمونه های خون ۲۰۰ فرد بیمار و سالم جداسازی شده و دو پلی مورفیسم rs2254298 و rs53576 از ژن گیرنده اکسی توسین را با بهره گرفتن از تکنیک PCR-RFLP مورد بررسی قرار دادیم.
نتایج: در این پژوهش اختلاف معناداری بین دو جایگاه پلی مورفیسم ژن گیرنده اکسی توسین(OXTR) و خطر ابتلا به اسکیزوفرنی مشاهده نشد.
نتیجه گیری: در این پژوهش، نتایج ما نشان می دهد که رابطه ی معناداری بین این دو SNP و خطر ابتلا به اسکیزوفرنی وجود ندارد و بنابراین پیشنهاد می گردد که جایگاه های بیشتر این گیرنده مورد بررسی قرار گیرد.
فصل اول: مقدمه
۱-۱- مقدمه
اسکیزوفرنی یکی از شایع ترین اختلالات شدید روانی است، که بارزترین علائم آن را می توان تغییر در تفکر و رفتار دانست، که این علائم به صورت مثبت و منفی طبقه بندی می شوند[۱]. در بسیاری از بیماران مبتلا به اسکیزوفرنی علائم عود بلند مدت در زندگیشان باقی می ماند، اما در برخی از بیماران این علائم در محدوده سنی ۳۵-۱۵ سال تاثیر می گذارد[۲]. علائم بیماری در مردان اغلب در اواخر نوجوانی و اوایل دهه بیست سالگی آغاز می شود و بعد از آن در زنان، علائم خود را نشان می دهد. مطالعات نشان داده که اسکیزوفرنی در حدود ۷ در هر ۱۰۰۰ از جمعیت بزرگسال تاثیر  می گذارد، اما از آنجا که این اختلال مزمن است احتمال بروز آن بالاست [۳]. (در حدود ۱/۰ درصد از جمعیت)
تحقیقات نشان می دهد که بیماری اسکیزوفرنی ممکن است در اثر تغییر در سطح مواد شیمیایی مورد استفاده ی ارتباطات مغزی (از جمله انتقال دهنده های عصبی یا هورمونها) ایجاد شود [۴].
مطالعات ژنتیکی نشان داده، اثرات متقابل چندین ژن توسط استرس ها در طول عمر و عوامل محیطی (از جمله عفونت های ویروسی رحم، اکسیژن محدود شده در هنگام تولد، وضعیت جغرافیایی و غیره) باعث افزایش ریسک ایجاد آن می شود، بنابراین اسکیزوفرنی وراثت پیچیده ای دارد [۵]. در دهه اخیر تحقیقات انجام شده بر روی اکسی توسین (OT) تاثیر این هورمون را در اختلالات اسکیزوفرنی نشان می دهد[۶]. ژن رسپتور اکسی توسین (OXTR) محدوده ۱۷ کیلوبایت روی کروموزوم ۳P25.3 انسانی را به خود اختصاص داده، و همچنین دارای ۳ اینترون و ۴ اگزون می باشد. اکسی توسین با واسطه OXTR در میومتر و آندومتر و همچنین بافت های محیطی و سیستم عصبی مرکزی فعال می شود. اکسی توسین در میومتر با فعال کردن فسفولیپاز C، باعث افزایش غلظت کلسیم داخل سلولی و در نتیجه انقباضات رحمی می شود[۷،۸]. گیرنده های اکسی توسین در مناطقی از سیستم عصبی از جمله آمیگدال، محور HPA و سیستم عصبی خودکار فراوانترند، که مسئول پردازش و تنظیم رفتارهای اجتماعی- عاطفی می باشند. گیرنده های اکسی توسین در بسیاری از مناطق مغز از جمله هسته های cAmyg و VMH یافت شده اند، که تفاوت در بیان گیرنده اکسی توسین بین این هسته ها با فعال شدن مسیرهای سیگنالینگ مجزا در مناطق مختلف مغز صورت می گیرد. با فعال شدن گیرنده اکسی توسین در هر کدام از این مسیرها نقش های متفاوتی ایجاد می گردد[۹].
هدف ما در این تحقیق بررسی نقش دو جایگاه پلی مورفیسم ژن گیرنده اکسی توسین در خطر ابتلا به بیماری اسکیزوفرنی با بهره گرفتن از تکنیک PCR-RFLP می باشد. پس از انجام آزمایشات متعدد از جمله واکنش زنجیره ای پلی مراز (PCR) و چندشکلی طولی قطعات محدود شده (RFLP) با بهره گرفتن از آنزیم محدودگر مناسب تاثیر این SNP ها در نمونه های سالم و بیمار شهرستان یاسوج بررسی شده است.
فصل دوم: مروری بر منابع
۱-۲- تعریف اسکیزوفرنی
اختلال اسکیزوفرنی یکی از شایعترین بیماری های سایکوتیک روانی است که فرد دچار ناهنجاری های شخصیتی می شود، در افراد مبتلا به این بیماری ارتباط منطقی بین افکار و احساساتشان دیده نمی شود. بنابراین بیماران دارای رفتارهای غیر عادی هستند[۱۰].
۲-۲- تاریخچه

واحد علوم و تحقیقات کرمان دانشکده علوم پایه، گروه زیست شناسی پایان نامه برای دریافت درجه کارشناسی ارشد در رشته ...

۱-۱۴-۱ خصوصیات گیاه شناسی ۳۰
۱-۱۴-۲ شرایط اقلیمی ۳۱
۱-۱۴-۳ کشت تربچه. ۳۳
۱-۱۵- اهداف تحقیق. ۳۴
۱-۱۶- فرضیه های تحقیق ۳۴
فصل دوم: مروری بر ادبیات و پیشینه تحقیق
۲-۱- پیشینه تحقیق. ۳۶
۲-۲- هدف پژوهش ۴۰
فصل سوم: روش اجرای تحقیق
۳-۱- تهیه کشت جوان و اطمینان از خالص بودن سویه نگهداری شده.۴۲
۳-۱-۱ رنگ آمیزی گرم ۴۲
۳-۱-۲ تکنیک کاور اسلیپ. ۴۲
۳-۲- پیش تست سویه مورد نظر برای اطمینان مجدد از انحلال فسفات در مقیاس آزمایشگاهی.۴۳
۳-۳- ارزیابی به کارگیری افزودنی­های لازم برای افزایش بقا سویه مورد نظر نسبت به تنش های محیطی مشتمل بر خشکی، شوری، دما، UV، pH
3-3-1 آماده سازی ماده حامل جهت تلقیح با باکتری. ۴۴
۳-۳-۲ اعمال تنش های محیطی بر روی تیمارها ۴۵
۳-۳-۲-۱ محیط کشت استارچ کازئین آگار ۴۶
۳-۳-۲-۲ محلول  کدورت سنجی مک فارلند ۴۶
۳-۳-۲-۳ محلول رقیق کننده. ۴۷
۳-۴- اعمال بهترین تیمار به گلدان ها و بررسی پایداری باکتری در ریزوسفر گیاه تربچه.۴۷
۳-۴-۱ روش کشت گلدانی تربچه. ۴۷
۳-۵- تاثیر سطوح مختلف تلقیح بر روی بقاء در سطح بذر تربچه۴۸
۳-۶- تاثیر سطوح مختلف تلقیح به کار برده شده در جذب فسفات توسط گیاه تربچه.۴۸
۳-۶-۱ اندازه گیری غلظت فسفر گیاه تربچه. ۴۸
۳-۶-۲ روش ساخت معرف وانادات – مولیبدات ۴۹
۳-۶-۳ روش تهیه محلول های استاندارد فسفر و رسم منحنی استاندارد.۴۹
۳-۷- بررسی بقاء باکتری در حامل‏های مختلف. ۵۰
۳-۸- نگهداری سویه مورد نظر برای مطالعات بعدی۵۰
۳-۸-۱ محیط کشت نوترینت براث (Nutrient Broth)51
3-8-2 محیط کشت TSA.
3-9- نتایج آنالیز خاک گلدان قبل از آزمون و پس از آزمون۵۲
۳-۱۰-  تجزیه وتحلیل آماری داده ها ۵۲
فصل چهارم: تجزیه و تحلیل داده ‏ها
۴-۱- تهیه محیط کشت تازه و اطمینان از خالص بودن سویه نگهداری شده۵۴
۴-۲- پیش تست سویه مورد نظر برای اطمینان مجدد از انحلال فسفات۵۴
۴-۳- تاثیر مواد حامل بر بقاء سویه باکتری ۵۵
۴-۳-۱ تاثیر تنش دمایی بر افزایش بقاء باکتری در فرمول.۵۵
۴-۳-۲ تاثیر تنش شوری بر افزایش بقاء باکتری در فرمول.۶۵
۴-۳-۳ تاثیر تنش خشکی بر افزایش بقا باکتری در فرمول. ۷۳
۴-۳-۴ تاثیر تنش PH بر افزایش بقا باکتری در فرمول ۷۶
۴-۳-۵ تاثیر تنش UV بر افزایش بقا باکتری در فرمول ۸۴
۴-۴- اعمال بهترین تیمار به گلدان و بررسی پایداری باکتری در ریزوسفر گیاه.۸۹
۴-۶- تاثیر سطوح مختلف تلقیح به کار برده شده در جذب فسفات توسط گیاه و نتایج آنالیز فسفات خاک گلدان‏ها و آنالیز فسفات گیاه.۹۶
۴-۷- بررسی بقاء باکتری در حامل‏های مختلف ۱۰۳
فصل پنجم: نتیجه گیری و پیشنهادات
۵-۱- نتیجه گیری ۱۱۱
۵-۲- پیشنهادات. ۱۱۹
منابع و مآخذ ۱۲۱
فهرست منابع فارسی. ۱۲۱
فهرست منابع انگلیسی. ۱۲۳
چکیده انگلیسی. ۱۲۶
چکیده:
مصرف بی رویه کودهای شیمیایی موجب عدم تعادل عناصر و مواد غذایی موجود در خاک، کاهش بازده محصولات کشاورزی و به خطر افتادن سلامت انسان­ها و دیگر موجودات زنده شده است. به همین علت امروزه استفاده از کودهای زیستی مورد توجه قرار گرفته است. باکتری­های حل کننده فسفات برای افزایش فراهمی فسفر

 مورد نیاز گیاه کارآمد به نظر می رسند. با توجه به اینکه اغلب خاک های ایران آهکی بوده و در اقلیم‏های خشک و نیمه خشک هستند، وجود pH بالا، درصد زیاد کربنات کلسیم، کمبود مواد آلی و خشکی خاک باعث شده اند که جذب فسفر کمتر از مقدار لازم برای تامین رشد بهینه اغلب محصولات کشاورزی باشد، لذا هدف از این پژوهش بررسی تاثیر spp.  Streptomyces جدا شده از خاک بر انحلال فسفات به منظور تولید کود زیستی فسفاته می باشد. جهت حداکثر افزایش بقاء باکتری در ماده حامل از سطوح تلقیح مختلفی که شامل لیگنیت و مواد تکمیلی پودر سویا و خاک فسفاته با نسبتهای مشخص بود استفاده شد و این مواد حامل تلقیح شده تحت تنشهای دما، شوری، خشکی، pH و uv قرار گرفتند همچنین کلیه مواد حامل ساخته و تلقیح شده بطور جداگانه در یک بازه زمانی ۹۰ روز از لحاظ بررسی بقاء باکتری سنجیده شدند. بهترین فرمول به دست آمده از تنشها در گلدان به کارگیری شد. همچنین تیمارهای دیگری نیز از لیگنیت با سطوح مختلف ساخته و با باکتری و بذر تربچه تلقیح شد و بقاء باکتری در بازه ۲۴ ساعته اندازه گیری شد و بعد از آن در گلدان به کار گرفته شدند. با توجه به نتایج به دست آمده بهترین فرمول به دست آمده از تنش­ها و بازه زمانی ۹۰ روز، فرمول لیگنیت + خاک فسفات ۲% + سویا ۱% تعیین شد و بعد از بکارگیری در گلدان بهترین نتیجه را نسبت به سایر مواد حامل و کنترل نشان داد و پارامترهای رشد گیاه تربچه و جذب فسفات گیاه را بهتر از تمامی مواد حامل و کنترل افزایش داده است. از بین تیمارهای ساخته شده و تلقیح شده به بذر تیمار شامل ۲۰۰ گرم حامل + خاک مزرعه بهترین نتایج را نشان داد و بعد از به کارگیری تیمارها در گلدان نیز تیمار شامل ۲۰۰ گرم حامل + خاک مزرعه بهترین نتیجه را نشان داد. این فرمول بهترین نتیجه را در پارامترهای رشد گیاه تربچه و جذب فسفات گیاه نسبت به سایر تیمارها نشان داد. در یک نتیجه گیری کلی، فرمول لیگنیت + خاک فسفات ۲% + سویا ۱% به عنوان فرمول نهایی و اصلی برای به کارگیری در آزمایشات بعدی و مقیاس مزرعه پیشنهاد می‏گردد.

فصل اول: کلیات تحقیق
۱-۱- مقدمه
طی چند دهه اخیر به علت افزایش جمعیت و تقاضای روزافزون برای مواد غذایی، مصرف کود های شیمیایی به منظور افزایش مقدار تولید در واحد سطح به شدت افزایش یافته است. استفاده از کودهای شیمیایی فسفاته تاریخچه دیرینه ای دارد و به انقلاب سبز و معرفی کودهای شیمیایی بر می گردد(ساریخانی و همکاران ۱۳۸۹، ۱۳).‏‏‏ مصرف بی رویه کودهای شیمیایی موجب عدم تعادل عناصر و مواد غذایی موجود در خاک، کاهش بازده محصولات کشاورزی و به خطر افتادن سلامت انسان ها و دیگر موجودات زنده خواهد شد. نیاز به جایگزینی مناسب برای کودهای شیمیایی زمانی احساس می شود که بدانیم علاوه بر آسیب های زیست محیطی ناشی از کاربرد کودهای شیمیایی، محدود بودن منابع، افزایش قیمت تمام شده و تثبیت شدن قسمت اعظمی از کودهای فسفاته مصرفی به شکل غیرقابل استفاده برای گیاه نیز پیامدهای استفاده از این کودهای شیمیایی هستند(ساریخانی و همکاران ۱۳۸۹، ۱۳).

مطلب دیگر :

منابع تحقیق درمورد ضمن عقد، عسر و حرج، عقد ازدواج


ضرورت یافتن جایگزینی مناسب برای رهاسازی فسفات تجمع یافته در خاک زمانی بیشتر احساس می شود که  بر این امر واقف گردیم که منابع فسفات موجود در خاک  قابلیت تامین فسفات مورد نیاز گیاهان برای تولید بهینه تا صد سال را دارا می باشد. بنابراین کافی است که این منبع عظیم فسفر را به صورت قابل جذب و استفاده برای گیاه تبدیل نمود (Bashan 1998, 16). به همین علت امروزه استفاده از کودهای بیولوژیک مورد توجه قرار گرفته است که مکانیسم عمل آنها قابلیت جذب عناصر غذایی گیاه در خاک را افزایش می‏دهد. باکتری­های حل کننده فسفات برای افزایش فراهمی فسفر مورد نیاز گیاه کارآمد به نظر       می رسند (Bashan 1998, 16). فسفر در خاک‌ها به دو شکل آلی و معدنی  وجود دارد اما غلظت فسفات محلول در خاک معمولاً خیلی پایین است (Bashan 1998, 16). قسمت اعظم میکرو ‏‏ارگانیسم‏های محلول کننده فسفات در ریزوسفر گیاهان متمرکز شده‌اند. میکروب‏های خاک توانایی تبدیل اشکال نامحلول فسفر به اشکال محلول را دارند. ترکیبات آلی و معدنی خارج شده از ریشه، باعث افزایش جمعیت میکروبی در اطراف ریشه می‌گردند . با توجه به اینکه میکروارگانیسم‏های محلول کننده فسفات در خاک به طور طبیعی وجود دارند و موجب افزایش فسفر قابل دسترس و تحریک رشد گیاه می‌شوند، اما تعداد آن‌ها در خاک به اندازه کافی نیست تا با سایر میکروارگانیسم‏هایی که در ریزوسفر قرار دارند رقابت کنند. بنابراین تلقیح گیاهان با میکروارگانیسم‏های محلول کننده فسفات اثرات مفیدی دارد. باکتری­های حل کننده فسفات طی سه مکانیسم تولید اسیدهای آلی، کلات کردن و واکنش های تبادل لیگاند موجب انحلال ترکیبات نامحلول فسفات می‏شوند. طی فرایند انحلال بخشی از فسفر محلول، توسط باکتری حل کننده فسفات استفاده می‏شود اما از آنجائیکه مقدار فسفر حل شده بیش از نیاز باکتری‏ها است لذا این مقدار آزاد می‏تواند در اختیار گیاه قرار گیرد. اغلب خاک‏های ایران دارای آهک و گچ بوده و این امر می‏تواند موجب تثبیت فسفر شود. در نتیجه فسفر جذب ذرات کلوئیدی خاک شده و از دسترس گیاه خارج می شود. بنابراین در غالب خاک‌ها از نظر مقدار فسفر کل مشکل وجود ندارد، بلکه مشکل، در دسترس قرار گرفتن آن می‌باشد. فسفر جذب عناصری مانند Ca2+، Fe3+  و Al3+ شده و باعث تشکیل ترکیبات نامحلول می‌گردد (Bhattacharyya and Jha 2012, 28).
[1]PGPR یا باکتری های تحریک کننده رشد گیاه، گروهی از باکتری‏های ریزوسفر هستند که به طور مستقیم (انحلال فسفات، تولید هورمون­ها.) و غیر مستقیم (تولید کاتالاز، سیانید هیدروژن و) موجب افزایش رشد گیاه می شوند. با توجه به طیف گسترده اثرات مثبت برخی از باکتری­های سودمند از قبیل تولید سیدروفور، تولید هورمون­ها و ویژگی بیوکنترلی آنها بر ضد قارچها و عوامل بیماریزا، متمرکز شدن بر تحقیقاتی که منجر به حصول چنین میکروارگانیسم های چند منظوره ای باشد بسیار مثمر ثمر خواهد بود، زیرا کودهای زیستی تلقیحات میکروبی هستند که علاوه بر افزایش جذب عناصر غذایی، موجب افزایش رشد گیاه می‏شوند، بنابراین با کاربرد سویه های PGPR  می‏توان چندین هدف را به طور همزمان دنبال کرد ((Boraste 2009, 1; Saharan and Nehra 2011, 21.
استفاده از ماده حامل مناسب در تولید یک کود زیستی با کیفیت بسیار مهم و ضروری است. ذغال­سنگ نارس[۲]، ذغال­سنگ قهوه­ای[۳]، چارکل[۴]، گل یا لجن فشرده، کودهای مزرعه­ای و مخلوط خاک­ها می­توانند به عنوان یک حامل مناسب استفاده شوند. ذغال سنگ طبیعی و ذغال سنگ قهوه ای حامل­های بهتری برای کودهای زیستی هستند. الحاق میکروارگانیسم به ماده حامل باید به گونه ای باشد که قابل حمل و لمس راحت و تجزیه طولانی باشد و کمترین اثر را روی کود زیستی بگذارد. بر طبق تحقیقات هوبن[۵] و سوماسه گاران[۶] یک ماده حامل خوب برای تلقیح بذر، باید ارزان و به راحتی در دسترس باشد، علاوه بر این نباید برای سویه های باکتریایی و گیاه سمی باشد زیرا حامل می تواند روی بذر اثر بگذارد. همچنین حامل باید ظرفیت جذب رطوبت خوبی داشته باشد و به خوبی به بذر متصل شود و در نهایت حامل باید ظرفیت بافری و pH مناسبی داشته باشد و به راحتی بتوان آن را با اشعه گاما یا اتوکلاو استریلیزه کرد (Boraste 2009, 1).
باتوجه به اینکه در خاک های آهکی ایران که در اقلیم های خشک و نیمه خشک تحول پیدا کرده اند، وجود pH بالا، درصد زیاد کربنات کلسیم، کمی مواد آلی و خشکی خاک باعث شده اند که جذب فسفر کمتر از مقدار لازم برای تامین رشد بهینه اکثر محصولات کشاورزی باشد. لذا هدف از این پژوهش بررسی تاثیر   spp.  Streptomyces جدا شده از خاک بر انحلال فسفات به منظور تولید کود زیستی فسفاته می باشد.
۲-۱- روابط میکروارگانیسم با ریشه گیاهان
میکروارگانیسم های خاک ارتباط های گسترده و متنوعی با ریشه گیاهان عالی دارند که مهمترین آنها عبارتند از:
۱- همزیستی: به شکل ارتباط های میکوریزی و تشکیل گرهک در گیاهان خانواده لگومینوز میباشد.
۲- انگلی: دراین حالت ارگانیسم­های انگل به صورت غیراختصاصی تا بسیار اختصاصی عمل می کنند.
۳- روابط تقریباً نامشخص که در ریزوسفر و سطح ریشه گیاه وجود دارد.
خاک غنی از میکروارگانیسم هایی است که از لحاظ شکل، ساختار و نقش متفاوت هستند. از طرف دیگر خاک محیطی است که درآن بخش های زیرزمینی گیاه گسترش و استقرار می یابد. تراکم ریشه گیاهان عالی در خاک زیاد است. وقتی ریشه درخاک رشد می کند، شرایط خاک مجاور ریشه به طرق مختلف به طور قابل ملاحظه ای تغییر می کند. وقتی محیط کوچک خاک مجاور ریشه ها تغییر می یابد، این تغییرات روی میکروارگانیسم های خاکزی موجود دراین منطقه اثر می گذارند. گیاهان به طور ذاتی فاقد سیستم دفعی مشخصی بوده و بسیاری از ترکیبات به شکل مواد زائد از قسمت های مختلف اندام های گیاه آزاد می شوند. سطح ریشه یکی از این مناطقی است که از آنجا ترکیبات ناخواسته و به طور مستمر از گیاه تراوش می شوند و در مجاور سطح ریشه تجمع می یابند. موادی که به این صورت از ریشه ها آزاد می شوند، ترشحات نامیده می شوند. ترکیبات آلی و معدنی خارج شده از ریشه، باعث افزایش جمعیت میکروبی در منطقه اطراف ریشه ها می گردند. علاوه بر ترشحات، سلولهای جدا شده از ریشه که عمدتاً از کلاهک جوان در حال رشد ریشه مشتق می شوند،

دانشکده علوم پایه گروه زیست شناسی گرایش سیستماتیک گیاهی عنوان:

۲-۲-۱ نمونه برداری ۴۴
۲-۲-۲ اندازه گیری و آنالیز. ۴۵
۲-۳ مطالعه ی فیلوژنی مولکولی در گونه های Viola.
۲-۳-۱ استخراج DNA ژنومی از گیاه با بهره گرفتن از روش CTAB.
۲-۳-۱-۱ روش تهیه بافر CTAB.
۲- ۳ – ۱ -۲  تعیین غلظت و خلوص DNA.
۲- ۴  تکثیر قطعات DNA مورد نظر. ۵۲
۲- ۴- ۱ آغازگر ها ۵۲
۲- ۴- ۲ دستورالعمل واکنش زنجیره ای پلیمراز (PCR). 52
۲-۴-۳ برنامه واکنش PCR برای تکثیر قطعات  DNA مورد مطالعه. ۵۳
۲-۴-۴ الکتروفورز ژل آگارز. ۵۳
۲-۴-۵ تخلیص PCR.
۲-۴-۵-۱ تخلیص محصول PCR.
۲-۴-۵-۲ تخلیص محصول PCR  از ژل. ۵۵
۲- ۴-۶  تعیین توالی قطعات تکثیر یافته و آنالیز آنها. ۵۶
۲-۴-۷ آنالیز فیلوژنتیکی. ۵۷
۲-۴-۷-۲ روش بیشینه صرفه جویی ۵۸
۲- ۴- ۷-۳  روش بیشینه احتمال ۵۸
۲- ۴-۷- ۵ مقایسه دو روش آنالیزی MP  و ML
۲- ۴-۷- ۶ نحوه ی ترکیب دو مجموعه اطلاعاتی trnL-F و ITS.
فصل سوم: نتایج
۳-۱ کلید شناسایی گونه های Viola در شمال ایران ۶۲
۳-۲ شرح گونه های بخشه Viola
۳-۳ مطالعات تشریحی ۸۲
۳-۴ آنالیز عددی ۹۸
۳-۴-۱ زیربخشه Viola
۳-۴-۲ زیربخشه Rostratae
۳-۵ مطالعات ملکولی ۱۰۳
۳-۵-۲ تعیین توالی قطعه تکثیر یافته ۱۰۵
۳-۵-۳ آنالیز فیلوژنتیکی توالی ITS
۳-۵-۳-۱  آنالیزماکسیمم پارسیمونی داده های مولکولی nrDNA ITS
۳-۵-۳-۲ آنالیزماکسیمم پارسیمونی داده های trnL-F cpDNA
۳-۵-۳-۳  آنالیز Maximum Liklihood داده های nrDNA ITS
۳-۵-۳-۴ آنالیز Maximum Liklihood داده های trnL-F cpDNA.
۳-۵-۳-۵ آنالیزماکسیمم پارسیمونی داده های ترکیبی nrDNA ITS  وcpDNA trnL-F
۳-۵-۳-۶ آنالیز Maximum Liklihood داده های ترکیبی nrDNA ITS  وcpDNA trnL-F
فصل چهارم: بحث
۴-۱ مطالعات تاکسونومیکی. ۱۲۴
۴-۲ مطالعات آناتومی ۱۲۷
۴-۳ تاکسونومی عددی ۱۲۹
۴-۴ مطالعات ملکولی ۱۳۰
۴-۵ پیشنهادات ۱۳۴
فصل پنجم: منابع
منابع ۱۳۶
چکیده:
در این مطالعه، بررسی بیوسیستماتیکی بخشه Viola از سرده Viola در شمال ایران از جنبه های مرفولوژیکی، آناتومیکی و ملکولی انجام شد. آنالیز عددی برای تاکسونهای جمع آوری شده از ایران متعلق به دو زیربخشه Viola و Rostratae به صورت جداگانه انجام گرفت و بر اساس نتایج حاصل از این آنالیز، گونه های هر کدام از زیربخشه های Viola و Rostratae از یکدیگر متمایز شدند. به منظور انجام مطالعات آناتومیکی، بخش های ریشه، ساقه رونده، برگ، دمبرگ و دمگل مورد بررسی قرار گرفت. نتایج نشان داد که صفات مورد بررسی در تمایز زیربخشه ها و گونه ها  مفید هستند. بر این اساس دو گونه V. alba ssp. alba و V. sintenisii، در برشهای ریشه در وجود یا عدم وجود ناحیه مغز و تعداد لایه های پارانشیمی زیر آوند چوب از یکدیگر متمایز گردیدند. دو گونه نزدیک V. caspia و V. reichenbachiana نیز در برش های ریشه، در وجود یا عدم وجود مغز و تراکم کریستالی از یکدیگر قابل تمایز بودند. در بررسی مولکولی، از دو نشانگر، شامل nrDNA ITS و cpDNA trnL-F برای تعیین حدود گونه ها استفاده شد. بر این اساس، گونه های این بخشه به خوبی از یکدیگر متمایز شدند. به منظور بازسازی روابط فیلوژنی بخشه Viola و بررسی میزان خویشاوندی این بخشه با سایر بخشه های سرده Viola، داده های مولکولی با بهره گرفتن از روش بیشینه صرفه جویی تعبیه شده در نرم افزار PAUP* 4.b10 و روش بیشینه احتمال در نرم افزار TreeFinder (Version Of March 2011) آنالیز شدند. درخت مطلق مرکزی با بیشترین پارسیمونی برای داده های ترکیبی ITS و trnL-F، یک کلاد با ارزش حمایتی ۱۰۰% را برای بخشه Viola بادو زیر بخشه Viola و  Rostratae نشان می دهد. نتایج حاصل از این مطالعه، حضور ۶ گونه و ۳ زیر گونه را تایید کرده است. نتایـج به دست آمده نشان داد که V. alba ssp. alba و V. sintenisii به صورت سیمپاتریک در شمال ایران پراکنش دارد.
مقدمه:
۱-۱- تاریخچه مطالعات سیستماتیکی سرده Viola 
سرده .Viola L. با دارا بودن ۶۰۰-۵۲۵ گونه همـی کریپتوفیت[۱]، کامـوفیت[۲] و فانـروفیت[۳] بزرگتـرین سـرده خانـواده Violaceae اسـت Clausen, 1964; Ballard, 1996)). ایـن سـرده در سـال ۱۷۵۳ توسـط لینــه[۴] معـرفی شد و نمـونه تیپ  این سـرده، Vodorata است که در سال ۱۹۸۲ نمونه لکتوتیپ آن توسط Haesler جمع آوری و گزارش شد (Marcussen, 1998).
این سرده در سال ۱۸۲۳ توسط گیاهشناس سوئیسی De Candolle به بخشه ها و زیر بخشه های مختلف طبقه بندی شد (Chatterjee & Sharma, 1987). در سده گذشته، مونوگرافر آلمانی، Becker، اولین  تاکسونومیستی بود که این سرده را در سطح جهان بررسی کرد و تعداد بسیار زیادی گونه جدیـد و تقسیم بندیهای تاکسونومیکـی جدیدی معرفی کرد (Becker, 1916, 1917a, 1917b, 1918, 1922, 1923a, 1923b, 1923c, 1923d, 1924, 1925a). مطالعات وی در ایـن زمینـه (۱۹۲۵b)، اولیـن ارزیابـی جامـع سرده Viola را شامـل شناسـایی ۱۴ بخشه و تقـریباً دو برابر گروه های زیر بخشـه ای در جهـان، بوجـود آورد، بزرگتـرین بخشـه آن Nomimium بود که بعدها به نام بخشـه Viola تغییـر پیـدا کرد. سپس Clausen (1927, 1929, 1964) بازبینی های تاکسونومیکی عمده ای بر طبقه بندی Becker انجام داد که اغلب آنها توسط متخصصان بعدی پذیرفته شد، در حالیکه قسمتی هنوز مبهم باقی مانده است. متخصصان دیگر تغییرات دیگری اعمال کردند که عمدتاً شامل نامگذاری های اولیه بود (Bamford & Gershoy, 1930; Gershoy, 1934; Yuzepchuk & Klokov, 1974). Clausen گروه های بدون ساقه اصلی با عدد کروموزومی پایه x=12 یا مشتقات آنیوپلوئیدی را در بخشه Plagiostigma قرار داد و گروه های با عدد پایه کروموزومی x=10 را در بخشه Nomimium (بخشه نامعتبر Rostellatae در طبقه بندی خودش) قرار داد که اکنون به میزان زیادی کاهش پیدا کرده است. وی همچنین گروه هایی که به طور برجسته دارای ساقه اصلی و گلهای زرد بودند را از سری ها و زیربخشه ها به بخشه Chamaemelanium ارتقاء داد و بخشه Nuttallianae را به تعدادی زیر بخشه تقسیم کرد. اگرچه برخی متخصصان بخشه Dischidium در طبقه بندی Becker را حفظ کردند و زیر بخشه Orbiculares را در بخشه Nomimium ابقا کردند، Clausen بخشه Dischidium و Orbiculares را ادغام کرد و آنها را در بخشه Chamaemelanium، زیر بخشه Beflorae که به صورت نامعتبر چاپ شده بود، قرار داد. Clausen و دیگر متخصصان عقاید متفاوتی درباره محدوده و مرتبه گروه های Adnatae، Diffusae، Langsdorffianae، Stolonosae و Vaginate ابراز کرده اند (Ballard et al., 1999).
تصویری از خلاصه طبقه بندی Becker و تغییرات عمده اعمال شده توسط محققین بعدی در شکـل ۱-۱-۱ نشان داده شده است.
۲-۱- موقعیت سیستماتیکی تیره Violaceae 
تیره Violaceae Batsch. با ۲۳ جنس و نزدیک به ۹۰۰-۸۲۵ گونه عموماً در نواحی گرمسیری و نیمه گرمسیری جهان پراکنش دارد (Munzinger & Ballard, 2003; Melchior, 1925; Valentine, 1962; Watson & Dallwitz, 1992-97; Kruse, 1994). این تیره به مدت طولانی به عنوان تیره اصلی[۱] راسته Violales شناخته می شد (Cronquist, 1981; Takhtajan, 1997)، ولی بر اساس مطالعات ملکولی در راسته Malpighiales قرار گرفته است (APG II, 2003; APGIII, 2009). دراین راستـه، تیـره Violaceae و ۴ تیـره دیگـر (Achariaceae, Lacistemataceae, Passifloraceae & Salicaceae) یک کلاد را تشکیل می دهند (Davis et al., 2005; Tokuoka & Tobe, 2006) و Violaceae به عنوان گروه خواهری با Passifloraceae در نظر گرفته می شود (Soltis et al., 2007; Tokuoka & Tobe, 2006).
طبقه بندی تیره Violaceae توسط چندین گیاه شناس بررسی شده است (Melchior, 1925; Hekking, 1988; Munzinger & Ballard, 2003). با توجه به اغلب سیستم های طبقه بندی اخیر، این تیره به ۳ زیر تیره تقسیم می شود: Leonioideae و Fusispermoideae از آمریکای جنوبی، که هر دو مونوژنریک و به طور مشخص ابتدایی هستند (Hodges et al., 1995; Hekking, 1988) و Violoideae که اشتقاق بیشتری دارد و بقیه سرده را شامل می شود. این طبقه بندی بر اساس پیچش گل در غنچه[۲]، میوه، نوع بذر و میزان اتصال سطح پشتی بساک ها بوده است (Hekking, 1988; Munzinger & Ballard, 2003). زیر تیره Violoideae بر اساس دو صفت جام گل منظم یا نامنظم و حضور یا عدم حضور شهدگاه[۳] به ۲ طایفه Violeae و Rinoreae تقسیم می شود (Hekking, 1988; Munzinger & Ballard, 2003)، که سرده Viola متعلق به طایفه Violeae می باشد.
۳-۱- موقعیت سیستماتیکی سرده Viola
سرده Viola  بر اساس سیستم APG III طبق سلسله مراتب طبقه بندی زیر قرار می گیرد (APG III, 2009)


گونه های Viola در ایران بر اساس فلور ایران، در دو بخشه قرار می گیرند: بخشه Viola با ۱۴ گونه و بخشه Melanium  با ۵ گونه (خاتم ساز، ۱۹۹۱). این تقسیم بندی در فلورا ایرانیکا به این صورت است:
بخشه Viola با ۹ گونه، بخشه Melanium با ۴ گونه و بخشه Sclerosium با ۲ گونه.
۴-۱- شرح ریخت شناسی تیره Violaceae
گیـاهانی علفی، درختچـه ای یا درختـی؛ کرک ها اغلب ساده؛ برگ ها متنـاوب یا متقابل، گاهی تشکـیل رزت انتهایی می دهند؛ ساده یا گاهی لوبدار، با حاشیه کامل یا اره ای و رگبندی شانه ای یا پنجه ای؛ دارای گوشوارک. گل آذین اغلب کاهش یافته به صورت یک گل منفرد، معمولاً محوری؛ گل ها اغلب دوجنسی؛ کاسبرگ ها ۵ عدد، جدا از هم، گلبرگ ها ۵ عدد، جدا از هم، با آرایش متراکب [۱]یا حلقوی[۲]، گلبرگ پایینی گاهی مهمیز دار. پرچم ها معمولاً ۵ عدد، کنار یکدیگر به صورت یک حلقه به دور مادگی قرار گرفته اند، میله بسیار کوتاه، جدا از هم تا کمی پیوسته، دو بساک پشتی یا همه بساک ها با شهدگاه مهمیزی یا غده ای شکل، اغلب به یک زایده رأسی سه گوش یا غشایی متصل شده؛ دانه های گرده اغلب Tricolporate؛ برچه ها معمولاً ۳ عدد، متصل؛ تخمدان فوقانی، با تمکن جانبی؛ خامه معمولاً خمیده یا نوک دار، کلاله معمولاً پهن شده، گاهی لوبدار. تخمک ها یک عدد یا بیشتر در هر تمکن؛ میوه معمولاً کپسول چند خانه ای؛ بذر ها معمولاً دارای زایده آریل.
۵-۱- شرح ریخت شناسی سردهViola

مطلب دیگر :

بهترین زمان برای دوش گرفتن چه موقع است؟


ریخت شناسی گل
سرده Viola بر اساس ریخت شناسی گل به دو دسته تقسیم می شود (Tutin et al., 1968): بخشه Melanium که Pansies نامیده می شوند و سایر بخشه ها که با نام عمومی Violets شناخته می شوند. وجه تمایز دو گروه نحوه قرارگیری گلبرگ های کناری است که در Violets به سمت پایین و در Pansies به سمت بالا است. ویژگی های متمایز کننده دیگر عبارتند از: (i) پراکنش بیوجغرافیایی: Pansies تنها در اروپا و غرب آسیا پراکنش دارد، درحالیکه Violets همه جا زی[۱] هستند (Clausen, 1929). (ii) وجود چند شکلی[۲] دانه گرده: بررسی ۲۸ گونه اروپایی Viola نشان می دهد که ۸۱% گونه های Pansies این چند شکلی را نشان می دهند در صورتی که این رقم برای Violets 42% است (Dajoz, 1999)؛ (iii) دیگر ویژگی های ریخت شناسی گل مانند طول جام گل و طول مهمیز؛ همچنین اکولوژی گرده افشانی در بین دو گروه به میزان زیادی متفاوت است (Beattie, 1971, 1974; Herrera, 1993; Ballard, 1996). Pansies تنها گل های برون زاد آور (Chasmogamous) تولید می کننـد (Knuth, 1908; Herrera, 1993)، در حالیکه Violets هر دو نوع گل های باز و جاذب حشرات (Chasmogamous) و گل های شدیداً کاهش یافته، بسته و خود گرده افشان (Cleistogamous) تولید می کنند (Beattie, 1969; Grime et al., 1986).
فرم رویشی: در سرده Viola، فرم رویشی به میزان قابل توجهی در بین گونه ها متفاوت است. ساختار پایه غالب در این سرده، ریزوم با برگ های رزت انتهایی (در چند ردیف)، چند ساله و ساقه گل دهنده جانبی (با برگ هایی در دو ردیف)، یک ساله است. این ساختار پایه برای مثال در V. riviniana و Vrupestris، به شکل های مختلف تغییر می یابد. در برخی گونه ها، برگ های رزت وجود نداشته و تنها ساقه گل دهنده خارج شده از ریزوم دیده می شود (V. elatior, V. canina). در برخی دیگر، ساقه هوایی به صورت ساقه رونده[۳] تغییر یافته (V. palustris, V. odorata) و یا اصلاًً وجود ندارد (V. hirta, V. somchetica). در بخشه Melanium سیستم ساقه ای اصلی به میزان زیادی تغییر یافته و به آسانی قابل شناسایی نیست. گونه های درختی و درختچه ای در هاوایی دیده می شود (V. tracheliifoliaV. waialenalenae).  به گونه هایی که گل های آن در ساقه های هوایی قرار دارد، ساقه دار[۴]  و به آن دسته که گل ها از محل خروج  برگ های رزت ایجاد می شوند، بدون ساقه[۵] می گویند.
برگ: برگ ها ساده، رزت و یا ساقه ای با آرایش متناوب؛ معمولاً قلبی شکل، کلیوی شکل تا سه گوش، گاهی کشیده یا تخم مرغی و یا  قاشقی؛ حاشیه کامل، دندانه دار یا اره ای؛ دمبرگ دار.
کرک:  در صورت وجود ساده، با اندازه متغیر در بین گونه ها، به صورت پراکنده تا متراکم یا پشم آلود.
گوشوارک: ساده یا لوبدار تا منقسم و برگی شکل؛ حاشیه ساده، دندانه دار یا شرابه ای تا مژه دار.
گل آذین: به صورت گل منفرد دیده می شود که به صورت محوری روی ساقه گل دهنده قرار می گیرد و یا از رزت و یا ساقه رونده تشکیل می شود.
گل ها: دو جنسی؛ ریزان؛ نامنظم؛ دارای مهمیز؛ بنفش تا آبی، گاهی سفید یا زرد یا ترکیبی از اینها.
اجزاء گل:
گلبرگ: نامنظم؛ ۵ عدد؛ جدا از هم؛ واژ تخم مرغی یا گرد؛ هم اندازه، بزرگتر یا کوچکتر از کاسبرگها؛ دو گلبرک کناری به سمت بالا (بخشه Melanium) و یا پایین (سایر بخشه ها)؛ گلبرگ پایینی مهمیز دار، گاهی رنگی یا مخطط (جاذب گرده افشان ها).
کاسبرگ: پایا؛ نامنظم؛ ۵ عدد، جدا از هم؛ تخم مرغی، نیزه ای یا سه گوش؛ حاشیه ساده یا مژه دار.
پرچـم: ۵ عدد، جدا از هم، فاقـد میـله، در رأس به زایـده غشایـی سه گوش متصـل است و به صورت حلقـه ای دور مادگـی را فرا مـی گیرد. دو بساک به همدیگر چسبیده است و هر کدام با یک شکاف باز می شود. دو پرچم پایینی زایده دار است که به درون مهمیز کشیده می شود.
مادگی: تخمدان زبرین؛ گاهی اوقات در داخل تخمدان کرکدار؛ خامه نوکدار؛ کلاله در برخی گونه ها پهن شده (زیر بخشه Viola)، غده ای یا مودار.
برگه: در اغلب گونه ها روی دمگل قرار دارد؛ متقابل یا تقریباً متقابل؛ حاشیه ساده، مژه دار یا کرکدار.
میوه: کپسول سه خانه ای، اغلب همراه با خامه پایا؛ گرد، مستطیلی یا سه گوش؛ شکوفا با ۳ شکاف (بخشه Melanium و زیر بخشه Rostratae) و یا نا شکوفا (زیر بخشه Viola)؛ به رنگ سبز، بنفش یا سبز با لکه های بنفش؛ کرکدار (زیربخشـه Viola) یا فاقـد کرک (سایر گونه ها)؛ خوابیـده روی زمین (زیربخشه Viola) یا افراشتـه (سایر گونه ها) در حالت رسیده.
بذر: به تعداد زیاد؛ همراه با زایده آریل؛ کرم تا قهوه ای.
[۱] Cosmopolitan
[۲] Heteromorphism
[۳] Stolon
[۴] Caulescent
[۵] Acaulescent
[۱] Imbricate
[۲] Convolute
[۱] Core
[۲] Aestivation
[۳] Nectaries
[۱] Hemicryptophyte
[۲] Chamaephyte
[۳] Phanerophyte
[۴] Linneus
تعداد صفحه : ۱۶۵
قیمت : ۱۴۷۰۰ تومان