4.3.2 تایید بیان واضح ژن GFP-TGIF2LX توسط Realtime RT- PCR.. 102
4.3.3 مطالعه بیان ژن TGIF2LX در سلول های ترانسفکت شده با وکتور حاوی GFP-TGIF2LX در سطح پروتئین بوسیله Western Blot 104
4.3.4 مطالعه بیان اثر داروی SD-208 بر روی بیانTGIF2LX در سلولهای ترانسفکت شده Y79 در مقایسه با نمونه های کنترل 105
4.4 بررسی اثر بیان افزایشی TGIF2LX بر روی سلولهای Y79. 105
4.4.1 نتایج ازمایش (MTT)Microculturetetrazolium Test 105
4.4.2 بررسی اثر متقابل SD-208 و بیان افزایشی TGIF2LX بر روی سلولهای Y79 در مقایسه با کنترل.. 106
4.5 بررسی بیان miRNA Let7g,18a,34a.22,20a در سلولهای ترانسفکت شده و کنترل.. 108
4.6 مطالعه بیان اثر داروی SD-208 بر روی بیان miRNA Let7g,18a,34a.22,20 در سلولهای ترانسفکت شده Y79 در مقایسه با نمونه های کنترل.. 109
4.7 Ct در واکنش Realtime PCR.. 110
فصل 5: بحث، نتیجه گیری و پیشنهادها 113
5.1 بحث 114
5.2 تاثیر بیان افزایشی TGIF2lX بر روی Cellular Viability در رده سلولی Y79. 116
5.3 تاثیر دارویSD-208 بر روی Cellular Viability در رده سلولی Y79 بیان کننده افزایشی TGIF2LX و کنترل 117
5.4 اثر SD-208 بر روی بیان TGIF2LX در رده سلولی Y79 ترانسفکت شده در مقایسه با کنترل 118
5.5 اثر متقابل SD-208 و TGIF2LX بر روی بیانmiRNA های مورد مطالعه. 118
5.5.1 اثر متقابل SD-208 و TGIF2LX بر روی بیان miRNAlet7g در رده سلولی Y79. 118
5.5.2 اثر متقابل SD-208 و TGIF2LX بر روی بیان miRNA18a در رده سلولی Y79. 119
5.5.3 اثر متقابل SD-208 و TGIF2LX بر روی بیان miRNA34a در رده سلولی Y79. 119
5.5.4 اثر متقابل SD-208 و TGIF2LX بر روی بیان miRNA22 در رده سلولی.. 119
5.5.5 اثر متقابل SD-208 و TGIF2LX بر روی بیان miRNA20a در رده سلولی Y79. 120
5.6 نتیجه گیری.. 120
7.5 پیشنهاد ها ……………………….121
منابع و مراجع.. 122
پیوست ها 131
1.1 رتینوبلاستوما
رتینوبلاستوما یکی از سرطان های بدخیم چشمی شایع کودکی میباشد که به دو فرم پراکنده (تک گیر) و ارثی(خانوادگی) وجود دارد [1]. تقریبا 4 درصد تومورهای کودکان را رتینو بلاستوما تشکیل میدهد .این تومور شایعترین بدخیمی اولیه چشمی است که در غرب 99درصد کودکان از این سرطان نجات پیدا میکنند ولی بیش از 90 درصدآنها بینایی خود را از دست میدهند و متاسفانه در کشورهای در حال توسعه بقا کودک تقریبا 50 درصد میباشد[2] و [3].
اغلب کودکان مبتلا به رتینوبلاستوما با علامت لوکوکوریا[1] (شکل 1‑1) که والدین آنها متوجه مشوند مراجعه میکنند[4].
| 1.1.1 اپیدمیولوژی |
رتینوبلاستوما تقریبا با شیوع 1 در 15000و 1 در 16600تولد زنده در امریکا و اروپای شمالی رخ میدهد [5] و [6] ودر بین سالهای 2005-2009شیوع سالیانه رتینوبلاستوما در امریکا 4.1 در هرمیلیون کودک زیر 15 سال میباشد[5] ودر کل دنیا سالیانه 5000تا 8000 کودک مبتلا به رتینوبلاستوما میشوند [7] به طور متوسط سن تشخیص بیماری زیر 2 سال است و تقریبا 95درصد قبل از 5 سالگی میباشد.شیوع بیماری در بین دختر وپسر و سیاه و سفید شبیه به هم میباشد[5].
تقریبا 1/4 موارد رتینوبلاستوما دو طرفه میباشد بیماریهای دوطرفه همیشه الگوی ارثی دارند. تومور های دو طرفه زودتر در کودکان رخ میدهد که نشان دهنده وجود موتاسیون در سلولهای زایا میباشد. فرم ارثی رتینوبلاستوما نیازمند یک جهش ژرم لاین است که میتواند از هر یک از والدین یا از محیط( که منجر به یک موتاسیون ژرم لاین شود) میباشد. بر عکس فقط 15 درصد از موارد یکطرفه ارثی هستند که اغلب چند کانونی هستند و باید از نظر جهش ژرم لاین بررسی شوند که معمولا در 2سال اول زندگی رخ میدهد کم تر از 10 درصد بیماران رتینوبلاستومایی تاریخچه مثبت خانوادگی دارند.
تقریبا 60 درصد کودکان با رتینوبلاستوما الگوی یک طرفه غیر ارثی دارند.کودکان با رتینوبلاستوما غیرارثی یک موتاسیون جدید در یک سلول شبکیه دارند که منجر به تومور می
این مطلب را هم بخوانید :
تگ عنوان یا Heading tag و روش های انتخاب آن برای یک مقاله
شوند [8] . ناهنجاری ژنتیک در فرم ارثی رتینوبلاستوما موجب ایجاد و پیشرفت تومور مثل استئوژنیک سارکوما وسارکومای بافت نرم(بخصوص لیومیوسارکوما)و ملانومای بدخیم میشود شیوع سرطان ثانویه بعد از تشخیص رتینوبلاستوما در فرم ارثی و غیرارثی به ترتیب 51 و 5 درصد میباشد که بیش از 60 درصد سرطان ها سارکوما میباشد [9].
1.1.2 پاتوژنز[2]
رتینوبلاستوما معمولا بوسیله غیر فعال شدن هر دو الل ژن رتینوبلاستوما رخ میدهد.با الگوی اتوزومی غالب این ژن در ناحیه کروموزم 13 بازوی بلند در ناحیه 14قرار دارد که کد کننده یک پروتئین هسته ای با نقش تومورساپرسوری میباشد [10].
مدل 2 ضربه ای که پیشنهاد شده است دلیل متفاوت بودن ویژگی های کلینیکی موارد ارثی و غیر ارثی رتینوبلاستوما را مطرح میکند[11]. (شکل 1‑2)
| شکل 1‑2: مدل 2 ضربه ای رتینوبلاستوما |
در مدل ارثی در ژن RB1 یک موتاسیون در کل سلول ها وجود دارد و ضربه دوم در مراحل بعدی تکامل رخ میدهد که این افراد مستعد رتینوبلاستومای دوطرفه و چندکانونی میباشند.ضربه دوم میتواند رخ دهد ویا توسط تغییرات اپیژنتیک خاموش شود.
در مدل رتینوبلاستومای غیر ارثی دو جهش در یک الل به صورت خودبه خودی در یک سلول سوماتیک شبکیه رخ میدهد که معمولا منجر به مدل کلینیکی تومور یه کانونی ویه طرفه رتینوبلاستوما میشود [12].
رتینوبلاستوما اگر درمان نشود رشد میکند و جای چشم را اشغال میکند وکره چشم را از بین میبرد و ممکن است طی 4 ماه بعد از تشخیص به مغز متاستاز بدهد و مرگ طی یک سال رخ بدهد.اغلب راههای متاستاز تومور به وسیله اپتیک نرو[3] به سیستم عصب مرکزی و یا گسترش از طریق مشیمیه به اربیت میباشد [13].
1.1.3 ویژگی های کلینیکی وتشخیصی
لوکوکوریا شایعترین علامت در کودکان رتینوبلاستومایی میباشد اگر چه علایم دیگر نیز وجود دارد و لوکوکوریا برای تشخیص ضروری نیست. شایعترین علایم لوکوکوریا (54درصد) و استرابیسم (19درصد) کاهش دید (4درصد) عفونت چشمی (5درصد) و تاریخچه خانوادگی مثبت (5درصد) میباشد و موارد دیگر عنبیه هتروکروم وخونریزی ویتره و هایفما بدون ضربه و گلوکوم و سلولیت اربیت و پروپتوزیس و درد چشم و تب میباشد [14].
1.2 تاریخچه خانوادگی
میزان خطر در میان نسل فرد بستگی به تاریخچه خانوادگی رتینوبلاستوما ویا چگونگی تومور در فرد نشانه دارد(به طور مثال یه طرفه یا دو طرفه یه کانونه یا دو کانونه).میزان خطر از 6 درصد (اگر پروباند
5-7- شبیهسازی و محاسبات در عملکرد عادی راکتور……………………. 88
5-7-1- چشمه تابشی……………………………………………….. 89
5-7-2- ارتفاع موثر در عملکرد عادی راکتور………………………….. 89
5-7-3- انتخاب بدترین روز از نظر فیزیک بهداشت…………………… 90
5-7-4- محاسبه دز دریافتی افراد در حالت عملکرد عادی راکتور…….. 91
5-8- شبیهسازی و محاسبات پس از وقوع حادثه………………………… 92
5-8-1- سناریوی حادثه……………………………………………… 92
5-8-2- چشمه تابشی……………………………………………….. 94
5-8-3- ارتفاع موثر…………………………………………………… 98
فصل ششم……………………………………………………………………. 99
نتایج و بحث……………………………………………………………….. 100
6-1- نتایج شبیهسازیها در عملکرد عادی راکتور…………………… 100
6-1-1- نتایج مربوط به شبیهسازی در تاریخ 9/1/2007……………. 102
6-1-2- نتایج مربوط به شبیهسازی در تاریخ 15/5/2009………….. 103
6-1-3- نتایج مربوط به شبیهسازی در تاریخ 19/7/2008………….. 104
6-1-4- نتایج مربوط به شبیهسازی در تاریخ 5/11/2010………….. 105
6-2- نتایج فاز اول شبیهسازیها در سناریوی وقوع حادثه…………… 106
6-3- نتایج فاز دوم شبیهسازیها در سناریوی وقوع حادثه………….. 107
6-3-1- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 8/1/2006 (ژانویه) 108
6-3-2- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 9/2/2006 (فوریه) 110
6-3-3- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 5/3/2012 (مارس) 111
6-3-4- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 18/4/2012 (آوریل) 114
6-3-5- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 23/5/2006 (می) 116
6-3-6- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 15/6/2009 (ژوئن) 118
6-3-7- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 25/7/2012 (جولای) 120
6-3-8- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 25/8/2010 (آگوست) 122
6-3-9- نتایج مربوط به شبیهسازی پس ازوقوع حادثه در 22/9/2011 (سپتامبر) 124
6-3-10- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 13/10/2006 (اکتبر) 126
6-3-11- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 10/11/2009 (نوامبر) 128
6-3-12- نتایج مربوط به شبیهسازی پس از وقوع حادثه در 26/12/2009 (دسامبر) 130
6-4- نتیجهگیری و پیشنهادات…………………………………………. 132
مراجع……………………………………………………………………… 134
پیوست الف: نرمافزارهای مختلف برای تخمین غلظت آلایندههای جوی…. 137
مقدمه
مواد پرتوزای طبیعی از بدو تشکیل کره زمین در آن وجود داشته است. ولی با توسعه فنآوری و بهرهبرداری انسان از آن، منابع پرتوزای ساخت دست بشر، در محیط زیست رو به افزایش گذاشته و مواد پرتوزای مصنوعی که در نتیجهی فعالیتهای بشری در رشتههای گوناگون هسته ای می باشد، به محیط زیست وارد شده، و به نحوی جزء آلاینده های غذایی، آشامیدنی و هوای تنفس موجودات زنده و به ویژه انسان محسوب میگردند.
به منظور حفاظت رادیولوژیکی محیط زیست و به تبع آن حفاظت رادیولوژیکی موجودات زنده به ویژه انسان، شناسایی توام اکوسیستم (مناطق خاص زندگی که در آن گیاهان و جانواران محیط اطراف خود را تقسیم میکنند) و منابع پرتوزا و نحوه عملکرد، جابجایی، توزیع و رفتار هسته های پرتوزا در اجزای اکوسیستم، ضروری است.
به طور کلی هدف از حفاظت رادیولوژیکی، پایش انسان و محیط زیست در برابر عملکرد مواد پرتوزای طبیعی و مصنوعی موجود در محیط میباشد و منظور از تحقیقات در این زمینه، پیشبینی مسیرهای راهیابی مواد پرتوزا به محیط زیست و تخمین میزان دز دریافتی توسط مردم در مناطق مختلف است تا بتوان میزان خطر ناشی از پرتوگیریهای داخلی و خارجی را تعیین کرد.
بنابراین مطالعات و بررسی مداوم، جهت تعیین عملکرد مواد پرتوزا در محیط زیست مورد نیاز می باشد، تا نتیجه مطلوب و اطلاعات مورد نظر حاصل شود. بدین ترتیب حفاظت رادیولوژیکی محیط زیست به عنوان یک ضرورت اجتنابناپذیر جهت تنظیم اکوسیستم و جلوگیری از پرتوگیری ناخواسته مطرح می باشد.
یکی از این منابع پرتوزایی ساخت بشر، راکتورهای هستهای هستند که در خلال کار عادی، کسر کوچکی از مواد پرتوزا را از طریق هوا به محیط زیست وارد میکنند.
انرژی هسته ای در سال های اخیر به دلایل زیر تبدیل به یک منبع مهم انرژی شده است:
فلزات سمی میباشند. تخلیه این پسابها در محیط باعث ایجاد مشکلات زیست محیطی میشود. این فلزات وارد زنجیره غذایی انسان شده و در بافت زنده تجمع میکنند. ارتباط انسان با فلزات سنگین در دههای اخیر و با ورود تکنولوژی و توسعه صنایع شیمیایی رو به افزایش بوده است[1].
استفاده از فلزات در فرایندهای صنعتی و محصولات تولیدی امروز نمودهایی از آن هستند: از جمله جیوه در پر کردن دندان استفاده میشود، سرب در بنزین خودروها وجود دارد که هر روزه با افزایش تعداد خودروها مقدار این فلز سنگین در محیط زیست خصوصاً شهرهای بزرگ رو به افزایش است. همچنین سرب در رنگها، مواد آرایشی، شامپوها و دیگر موادی که برای مو استفاده میشود وجود دارد. دهان شویهها، خمیر دندان و صابونها نیز حاوی مقادیری فلزات سنگین از جمله سرب میباشند.
در جوامع صنعتی امروز، گریزی از مواد شیمیایی و فلزات سمینیست. خصوصاً که خیلی از مشاغل و حرفهها مستلزم قرار گرفتن در معرض فلزات سنگین هستند. افراد در تنها بیش از 50 شغل مستلزم برخورد با جیوه هستند، مثل: پزشکان، کارکنان کارخانجات داروسازی، نقاشها، کارکنان چاپخانهها، فلزکارها، جوشکارها ، دکورسازها و سفالگرها.
تحقیقاتی که روی اثرات سمیفلزات سنگین انجام شده، تائید میکنند که این مواد میتوانند مستقیماً با مختل کردن عوامل مغزی و عصبی بر رفتار انسان اثر بگذارند. فلزات سنگین بر مواد انتقال دهنده پیامهای عصبی و عملکرد آنها تاثیر دارند و فرایندهای متابولیکی بیشماری در بدن را تغییر میدهند. سیستمهایی که عناصر فلزی سمی، میتوانند آنها را تخریب کنند
یا کارشان را با مشکل مواجه کنند جاهایی مثل: خون و عروق قلبی،مسیرهای سم زدایی بدن و مسیرهای تولید انرژی، آنزیم ها، سیستم گوارشی، ایمنی، اعصاب مرکزی و محیطی، تولید مثل و مجاری ادراری هستند .
تنفس ذرات فلزات سنگین، حتی در مقادیر کم میتوانند اثر جدی روی سلامت انسان داشته باشند. فلزات سنگین میتوانند واکنشهایی حساسیتی را افزایش دهند، جهشهای ژنتیکی ایجاد کنند، با عناصر کمیاب مفید برای بدن در واکنشهایی بیوشیمیایی رقابت کنند و نیز مثل آنتیبیوتیکها عمل کنند و هر دو دسته مفید و مضر باکتریها را از بین ببرند. بیشتر اثر تخریبی فلزات سمی، ناشی از افزایش اکسید شدن رادیکالهای آزاد توسط آنها است. رادیکالهای آزاد به طور طبیعی وقتی سلولها با اکسیژن واکنش میدهند (اکسایش) تولید میشوند. اما در حضور فلزات سنگین سمییا کمبود آنتی اکسیدانها، به صورت کنترل نشده ای تولید میشوند. آنتی اکسیدانها مثل ویتامینهای A, C, E فعالیت رادیکالهای آزاد را کم میکنند.این مطلب را هم بخوانید :
2-13-5- اثر آستنیت باقیمانده. 50
2-13-6- روشهای آزمون سایش……. 51
2-14- خلاصه تحقیقات انجام شده در خصوص نایهارد 4.. 53
2-15- جمع بندی و هدف از تحقیق…. 54
فصل 3- روش تحقیق 55
3-1- طراحی آزمایش……. 56
3-1-2- تهیه مدل و قالبگیری… 57
3-1-3- ذوب و بارریزی… 58
3-1-4- ترکیب شیمایی چدن نایهارد4 ریخته شده. 58
3-1-5- عملیات حرارتی ناپایدارسازی… 59
3-1-6- مطالعات میکروسکوپی برای بررسی ریزساختار.. 59
3-1-7- آنالیز تفرق اشعه X (XRD) 60
3-1-8- آزمون سختی…. 60
3-1-9- آزمون سایش……. 61
فصل 4- نتایج و بحث 63
4-1- بررسی ریزساختار و سختی چدن نایهارد در حالت ریختگی…. 63
4-2- اثر زمان ناپایدارسازی بر سختی…. 65
4-3- اثر زمان ناپایدارسازی در دماهای مختلف بر ریزساختار.. 68
4-4- اثر دمای ناپایدارسازی در زمان ثابت بر سختی…. 79
4-5- اثر دمای ناپایدارسازی بر ریزساختار در زمان ثابت….. 82
4-6- بررسی ریزساختار با میکروسکپالکترونی روبشی…. 85
4-7- اثر عملیات تمپر بر تغییرات سختی و ریزساختار.. 86
4-8- اثر عملیات ناپایدارسازی بر مقاومت به سایش چدن نایهارد.. 91
نتیجهگیری 97
پیشنهادات برای تحقیقات بیشتر 99
مراجع 101
پیوست ها 107
این مطلب را هم بخوانید :
چدنهای مقاوم به سایش بر مبنای ریزساختار و آلیاژهای آنها به پنج گروه عمده تقسیم میشود که در این میان چدن نایهارد4 چدنی با 6% نیکل، 9% کروم و 2% سیلیسیم با کربن یوتکتیک و ساختاری با
3-8-4-1- ارزیابی خوردگی فولاد BCS………………………..
این مطلب را هم بخوانید :
خوردگی به شکلهای گوناگون در زندگی روزمره به چشم میخورد. نقاط و حفرههای قرمز مایل به نارنجی در تجهیزات نشتی مخازن آب، آب تیره خروجی از داخل شیرها،
همچنین میخها، چنگکها، لولهها، کانالها، ظروف آشپزخانه و قوطیهای حلبی خورده شده نمونههای متداولی از خوردگی هستند. خوردگی با دید غیر تخصصی اغلب بر کهنگی تجهیزات دلالت داشته و قابل چشم پوشی است. درصورتیکه خوردگی بیانگر کاهشی قابل توجه در ارزش یک جسم جامد است که در معرض یک برخورد شیمیایی مستقیم قرار گرفته است.
خوردگی محدود به فلز نبوده بلکه شامل مواد غیر فلزی مانند پلیمرها، مواد نسوز، مواد مرکب و مواد دیگر نیز میشود. از نظر ترمودینامیکی خوردگی یک فرآیند خود به خودی است که در جهت کاهش انرژی آزاد[2]حرکت میکند.